Skip to content
BRL-3A
Tissue
ตับ
Synonyms
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

Documents

BRL-3A

Cell line · Product number 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ BRL-3A ได้มาจากตับปกติของหนูบัฟฟาโลเพศผู้ ก่อตั้งขึ้นในปี พ.ศ. 2519 เซลล์ไลน์นี้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่สำคัญ ซึ่งใช้เป็นหลักในการศึกษาการทำงานของเซลล์ตับ กลไกการฟื้นฟูตับ และความเป็นพิษต่อตับเซลล์ BRL-3A ยังคงลักษณะหลายประการของเซลล์ตับปฐมภูมิ รวมถึงความสามารถในการสังเคราะห์อัลบูมินและโปรตีนในซีรัมชนิดอื่น ๆ ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการวิจัยด้านตับวิทยา เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เยื่อบุผิวและยึดเกาะได้ดีพร้อมอัตราการเจริญเติบโตสูงในสภาพเพาะเลี้ยง

ความสนใจทางวิทยาศาสตร์ใน BRL-3A ขยายไปถึงการประยุกต์ใช้ในการศึกษาการติดเชื้อไวรัสเฉพาะตับ การเผาผลาญยา และผลกระทบของปัจจัยการเจริญเติบโตและไซโตไคน์ต่างๆ ต่อเซลล์ตับนักวิจัยยังใช้เซลล์ BRL-3A ในการศึกษาผลกระทบของสารพิษและสารก่อมะเร็งต่อการทำงานของตับ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกระบวนการเกิดมะเร็งตับและการบาดเจ็บของตับ เซลล์เหล่านี้เป็นที่ทราบกันว่ามีปฏิกิริยาตอบสนองต่อสารกระตุ้นการเพิ่มจำนวนเพอร์ออกซิโซม และถูกนำมาใช้ในการทดสอบประสิทธิภาพและความปลอดภัยของยาที่อาจส่งผลต่อการทำงานของตับ

อย่างไรก็ตาม แม้ว่าจะมีความหลากหลายในการใช้งาน ผู้ใช้สายเซลล์ BRL-3A ต้องพิจารณาข้อจำกัดที่มีอยู่ในโมเดลที่ไม่ใช่มนุษย์ เนื่องจากผลลัพธ์อาจไม่สามารถแปลตรงไปยังสรีรวิทยาของตับมนุษย์ได้เสมอไป ปัจจัยนี้เน้นย้ำถึงความสำคัญของการยืนยันผลการวิจัยด้วยโมเดลและวิธีการทดลองเพิ่มเติม

Tissue
ตับ
Synonyms
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
BRL-3A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 500129)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expression and susceptibility

Products
กิจกรรมกระตุ้นการคูณ (MSA)

05Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
แนะนำให้มีความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงที่ 1 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า