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BRL-3A
Tissue
Fígado
Synonyms
BRL3A, BRL 3A, Buffalo Rat Liver-3A

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BRL-3A

Cell line · Product number 500129

The BRL-3A cell line is derived from the normal liver of a male Buffalo rat. Established in 1976, this cell line is an important in vitro model primarily ...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

A linhagem celular BRL-3A é derivada do fígado normal de um rato Buffalo do sexo masculino. Estabelecida em 1976, essa linhagem celular é um importante modelo in vitro utilizado principalmente para o estudo da função dos hepatócitos, dos mecanismos de regeneração hepática e da hepatotoxicidade. As células BRL-3A mantêm várias características dos hepatócitos primários, incluindo a capacidade de sintetizar albumina e outras proteínas séricas, o que as torna uma ferramenta valiosa na pesquisa hepatológica. Essas células apresentam uma morfologia semelhante à epitelial e são aderentes, com alta taxa de crescimento em cultura.

O interesse científico pela BRL-3A se estende à sua aplicação no estudo de infecções virais específicas do fígado, no metabolismo de medicamentos e nos efeitos de vários fatores de crescimento e citocinas nas células hepáticas. Pesquisadores também utilizam as células BRL-3A para investigar o impacto de toxinas e carcinógenos na função hepática, fornecendo insights sobre a hepatocarcinogênese e lesões hepáticas. Sabe-se que as células respondem a proliferadores de peroxissomas e têm sido utilizadas para testar a eficácia e a segurança de medicamentos que possam afetar a função hepática.

No entanto, apesar de sua versatilidade, os usuários da linhagem celular BRL-3A devem levar em conta as limitações inerentes a um modelo não humano, já que os resultados nem sempre podem ser diretamente transpostos para a fisiologia do fígado humano. Esse fator ressalta a importância de corroborar os resultados com modelos e abordagens experimentais adicionais.

Tissue
Fígado
Synonyms
  • BRL3A
  • BRL 3A
  • Buffalo Rat Liver-3A

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
BRL-3A (número de catálogo da Cytion 500129)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0606

04Expression and susceptibility

Products
Atividade de estimulação da multiplicação (MSA).

05Handling and culture

Culture medium
F12 de Ham, contendo: 1,0 mM de glutamina estável, 1,0 mM de piruvato de sódio e 1,1 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820600a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
Recomenda-se uma densidade de semeadura de 1 x 10⁴ células/cm².
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.