เซลล์ P19 - การวิจัยมะเร็งเซลล์ต้นกำเนิดโดยใช้เซลล์ P19

P19 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งตัวอ่อนของหนู ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาการพัฒนา ชีววิทยาของเซลล์ต้นกำเนิด การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ และการคัดกรองยา เนื่องจากเซลล์ P19 มีความสามารถในการเปลี่ยนแปลงรูปร่าง (differentiation ability) จึงสามารถนำไปใช้ในการศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการทางชีววิทยาที่ซับซ้อน เช่น การสร้างเนื้อเยื่อและการพัฒนาตัวอ่อนในระยะแรกได้ ในบทความนี้ เราจะกล่าวถึงพื้นฐานของเซลล์ P19 ที่ได้มาจากหนู

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ P19

การทราบถึงลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ไลน์เป็นสิ่งจำเป็นก่อนที่คุณจะเริ่มทำงานกับมัน บทนี้จะครอบคลุมถึงสิ่งต่อไปนี้: เซลล์ไลน์ P19 คืออะไร? ขนาดของเซลล์ P19 คืออะไร? แหล่งกำเนิดของเซลล์ P19 คืออะไร?

• P19 เป็นชนิดของเซลล์มะเร็งตัวอ่อนที่มีศักยภาพในการสร้างเซลล์หลายชนิด (pluripotent embryonal carcinoma cells) ซึ่งได้มาจากเทราโตคาร์ซิโนมา (teratocarcinoma) ที่พัฒนาในหนู C3H/He สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นครั้งแรกในปี 1982 โดย McBurney และ Rogers
• เซลล์ P19 สามารถเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องในอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีซีรัมเสริมได้ สามารถถูกทำให้แตกต่างไปเป็นเซลล์ชนิดอื่นได้เมื่อได้รับสารเคมีที่ไม่เป็นพิษ เช่น กรดเรติโนอิก และไดเมทิลซัลโฟกไซด์ (DMSO) [1]
• เซลล์มะเร็งเต้านมของหนูเหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายกับเซลล์เยื่อบุผิว
• เซลล์ไลน์ P19 มีโครโมโซมเพศชายปกติ (n=40; XY)

การสร้างแบบจำลองการแบ่งเซลล์แบบไมโทซิสของเซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อน ซึ่งขยายภาพให้เห็นในกล้องจุลทรรศน์

ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ P19

เซลล์ไลน์ P19 ถูกเพาะเลี้ยงอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัยเนื่องจากลักษณะเฉพาะตัวที่โดดเด่น การเพาะเลี้ยงนั้นง่ายและสามารถควบคุมได้ดี ส่วนนี้ได้กล่าวถึงข้อมูลสำคัญทั้งหมดที่คุณจำเป็นต้องใช้ในการดูแลและเพาะเลี้ยงเซลล์ P19 เราจะทราบ: เวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ P19 คืออะไร? คุณเพาะเลี้ยงสายพันธุ์เซลล์ P19 อย่างไร? P19 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติดหรือไม่?

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ P19

เวลาสองเท่า:

ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าที่รายงานสำหรับสายเซลล์ P19 คือประมาณ 2 ถึง 3 วัน 

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์ไลน์มะเร็งตัวอ่อน P19 เป็นเซลล์ที่เกาะติด

อัตราส่วนการเพาะเลี้ยงต่อรุ่น:

เซลล์ P19 ควรถูกเพาะเลี้ยงต่อทุก 48 ชั่วโมง และควรรักษาอัตราส่วนการแบ่งเซลล์ที่ 1:10 สำหรับเซลล์เหล่านี้ เซลล์ที่เกาะติดควรถูกชะล้างด้วย 1 X phosphate buffer saline และบ่มด้วย Accutase จนกว่าเซลล์จะแยกออกจากกัน เซลล์ถูกเพิ่มด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อและเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่เก็บรวบรวมได้จะถูกแขวนลอยอย่างระมัดระวังและแบ่งใส่ลงในขวดใหม่

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

DMEM/Ham's F12 มีเซรั่มจากน้ำคร่ำของวัว 5% 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, 1.6 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, 15 มิลลิโมลาร์ HEPES และ 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ P19

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

ตู้ฟักแบบควบคุมความชื้นที่ตั้งไว้ที่ 37°C พร้อมการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงและเพาะเชื้อเซลล์มะเร็งตัวอ่อน P19

การเก็บรักษา: 

หลอดเซลล์ P19 ที่ถูกแช่แข็งควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C ในตู้แช่แข็งหรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวเพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์ในระยะยาว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

สามารถใช้วัสดุ CM-1 หรือ CM-ACF ในการแช่แข็งเซลล์ P19 โดยใช้วิธีการแช่แข็งช้า ซึ่งช่วยปกป้องเซลล์จากการช็อกและรักษาความมีชีวิตของเซลล์ไว้ได้

กระบวนการละลาย

สามารถละลายเซลล์ P19 ที่แช่แข็งได้โดยการวางในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C และเขย่าขวดอย่างรวดเร็วเป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ที่แช่แข็ง เซลล์จะถูกแขวนลอยอีกครั้งและเทลงในขวดใหม่เพื่อเพาะเลี้ยง

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 จำเป็นต้องใช้สำหรับสายเซลล์ P19

ชั้นของเซลล์ P19 ที่เกาะติดและกึ่งรวมตัวกันที่กำลังขยาย 10 เท่า และ 20 เท่า

เซลล์ไลน์ P19: ข้อได้เปรียบ & ข้อเสีย

ส่วนนี้จะกล่าวถึงข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ P19  

ข้อดี

• ศักยภาพในการเปลี่ยนแปลง: เซลล์ P19 สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ชนิดต่าง ๆ ได้ รวมถึงเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ เซลล์ประสาท และเซลล์ไมโครเกลีย พวกมันต้องการยาที่ไม่เป็นพิษสำหรับการเปลี่ยนแปลง เช่น กรดเรติโนอิก และไดเมทิลซัลฟอกไซด์ (DMSO) กรดเรติโนอิกกระตุ้นการพัฒนาของเซลล์ประสาท ไมโครเกลีย และแอสโทรจีเลีย ในขณะที่ DMSO เริ่มต้นการพัฒนาของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจที่เต้นและเซลล์กล้ามเนื้อเรียบ ดังนั้น เซลล์ P19 จึงมีประโยชน์ในการศึกษาการแยกแยะเซลล์และกระบวนการพัฒนา
• ระบบแบบจำลอง: สายเซลล์มะเร็งตัวอ่อนที่มีศักยภาพในการกลายเป็นเซลล์ต้นกำเนิดหลายชนิด P19 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการพัฒนาตัวอ่อนในระยะเริ่มต้น นักวิจัยใช้เซลล์ P19 เพื่ออธิบายกลไกการส่งสัญญาณระหว่างเซลล์และกลไกระดับเซลล์และโมเลกุลที่เกี่ยวข้องในกระบวนการเหล่านี้

ข้อเสีย

• มีต้นกำเนิดจากหนู: P19 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเยื่อบุโพรงของตัวอ่อนหนู ดังนั้น ผลการศึกษาที่ใช้เซลล์เหล่านี้อาจไม่สามารถนำไปใช้กับชีววิทยาและกระบวนการของมนุษย์ได้อย่างสมบูรณ์

การวิจัยการประยุกต์ใช้เซลล์ P19

เซลล์ P19 มีการใช้งานวิจัยหลายด้านเนื่องจากความสามารถในการเปลี่ยนแปลงรูปแบบและความเกี่ยวข้องกับชีววิทยาการพัฒนาและการวิจัยเซลล์ต้นกำเนิด การใช้งานวิจัยที่สำคัญบางประการของเซลล์มะเร็งตัวอ่อน P19 ได้แก่:

• การศึกษาการแยกตัวของเซลล์: ตามที่เราทราบกันดีว่า เซลล์ P19 สามารถแยกตัวเป็นเซลล์ประสาท, เซลล์ไมโครเกลียล, เซลล์กล้ามเนื้อเรียบ, และเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจได้; ดังนั้นจึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการแยกตัวของเซลล์. นอกจากนี้ ยังช่วยในการวิจัยเกี่ยวกับการพัฒนาของระบบประสาทและหัวใจ รวมถึงกลไกที่อยู่เบื้องหลัง. การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 พบว่า สารอนุมูลอิสระออกซิเจน (ROS) มีบทบาทในการชี้นำการแยกตัวของเซลล์ P19 ให้กลายเป็นเซลล์ชนิดเฉพาะ และยับยั้งการเหนี่ยวนำให้เป็นเซลล์ชนิดอื่น [3] การศึกษาอีกชิ้นหนึ่งได้สำรวจกระบวนการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาทที่เกิดจากกรดเรติโนอิกและพบว่ามีการมีส่วนร่วมของเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/Akt/GSK3β [4]
• ชีววิทยาการพัฒนา: เซลล์ P19 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการพัฒนาของตัวอ่อนในระยะแรกเริ่ม เซลล์เหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยเข้าใจกระบวนการทางชีววิทยาที่ซับซ้อน เช่น การก่อตัวของเนื้อเยื่อในระหว่างการพัฒนาของตัวอ่อน งานวิจัยนี้ใช้เซลล์ P19 และศึกษาปัจจัยโมเลกุลที่มีส่วนร่วมในการก่อตัวของภาวะผนังกั้นหัวใจห้องล่างรั่ว (VSD) ผลการวิจัยพบว่า RNA ที่ไม่เข้ารหัสยาว SNHG6 มีส่วนทำให้เกิด VSD โดยควบคุม miRNA-101 ในทางลบและกระตุ้นเส้นทาง Wnt/β-catenin [5]
• การทดสอบยา: สายพันธุ์เซลล์มะเร็งตัวอ่อนหนู P19 ยังถูกใช้ในการคัดกรองยาที่มีศักยภาพ การศึกษาใช้เซลล์ประสาท P19 ที่แตกต่างกันและตรวจสอบผลยับยั้งเอนไซม์อะเซทิลโคลีนเอสเตอเรสที่ปกป้องระบบประสาทของสารสังเคราะห์ L-Dopa และสารสกัดจากเมล็ด Mucuna pruriens ในน้ำ ผลการศึกษาพบว่าสารสกัดจากพืชแสดงผลลัพธ์ที่น่าพอใจเมื่อเทียบกับ L-Dopa [6]

ซื้อสายพันธุ์เซลล์ P19 ของคุณวันนี้

เซลล์ P19: สิ่งพิมพ์วิจัย

บทความส่วนนี้จะครอบคลุมงานวิจัยที่น่าสนใจบางฉบับที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ P19

หลักฐานใหม่ที่ว่าฮอร์โมนเพศจากต่อมใต้สมองควบคุมการอพยพ การยึดติด และการเพิ่มจำนวนของเซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อนและเซลล์เตราโตคาร์ซิโนมา

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Oncology Reports เมื่อปี 2017 การศึกษานี้เสนอว่าฮอร์โมนเพศจากต่อมใต้สมองเป็นตัวขับเคลื่อนการยึดเกาะ การเพิ่มจำนวน และการเคลื่อนที่ของเซลล์สายพันธุ์เทอร์ราโตคาร์ซิโนมา รวมถึงเซลล์ P19

RNA ที่ไม่เข้ารหัสยาว uc. 4 มีอิทธิพลต่อการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ TGF-beta

การตีพิมพ์ในวารสาร Experimental & Molecular Medicine (2018) นี้ใช้เซลล์ P19 และศึกษาการทำงานของ RNA ที่ไม่ถอดรหัสยาว uc.4 ผลการวิจัยพบว่า uc.4 มีผลต่อการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ผ่านการปรับเส้นทางสัญญาณ TGF beta

ผลรวมของการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติและสารสกัดจากเนื้อเยื่อธรรมชาติต่อการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งตัวอ่อน P19 ไปเป็นเซลล์ประสาท

บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2018 ในวารสาร Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine การศึกษาพบว่าสารสกัดจากเนื้อเยื่อสมองธรรมชาติและการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 3 มิติสามารถเร่งการเปลี่ยนสภาพของเซลล์มะเร็งตัวอ่อน P19 ให้กลายเป็นเซลล์ประสาทได้

การเหนี่ยวนำการแยกตัวในหลอดทดลองของเซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งเอ็มบริโอนัลให้เป็นเซลล์ที่ผลิตอินซูลินโดยใช้สารสกัดจากใบชิโครี (Cichorium intybus L.)

การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Ethnopharmacology ในปี 2020 การศึกษานี้เสนอว่าสารสกัดจากใบ Cichorium intybus L. สามารถกระตุ้นการเปลี่ยนสภาพของเซลล์มะเร็งเอ็มบริโอ P19 ให้กลายเป็นเซลล์เบต้าของตับอ่อนที่ผลิตอินซูลินได้

สารสกัดน้ำจากเมล็ด Mucuna pruriens ปรับปรุงผลในการปกป้องระบบประสาทและยับยั้งเอนไซม์อะเซทิลโคลีนเอสเตอเรสเมื่อเทียบกับ L-Dopa สังเคราะห์

งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Molecules (2022) การศึกษานี้สำรวจฤทธิ์ในการปกป้องระบบประสาทและยับยั้งเอนไซม์อะเซทิลโคลีนเอสเตอเรสของสารสกัดจากเมล็ด Mucuna pruriens ต่อเซลล์ประสาท P19

ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ P19: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนเกี่ยวกับเซลล์ P19

• โปรโตคอลการแยกเซลล์ประสาทของเซลล์ P19: บทความนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการแยกเซลล์ประสาทของเซลล์ P19 และข้อมูลที่เป็นประโยชน์อื่น ๆ เกี่ยวกับการแยกเซลล์ P19
• การถ่ายยีนในเซลล์ P19: ลิงก์นี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการทำโปรโตคอลการถ่ายยีนในเซลล์ P19

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ p19

• เซลล์ P19: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์ทั้งหมดเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ P19 รวมถึงสภาพการเพาะเลี้ยง สื่อที่ใช้เลี้ยงเซลล์ P19 การแบ่งเซลล์ และอื่นๆ อีกมากมาย

การสำรวจเซลล์ไลน์ P19: คำถามที่พบบ่อย

เอกสารอ้างอิง

1. McBurney, M.W., เซลล์มะเร็งเอ็มบริโอนัล P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): หน้า 135-40.
2. Bressler, J., และคณะ, P19 สายเซลล์มะเร็งตัวอ่อน: แบบจำลองเพื่อศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างยีนและสิ่งแวดล้อม. เทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์, 2011: หน้า 223-240.
3. Pashkovskaia, N., U. Gey, และ G. Rödel, ROS ในไมโตคอนเดรียชี้นำการแยกเซลล์ของเซลล์ P19 พลูริโพเทนต์ของหนู. Stem Cell Research, 2018. 30: หน้า 180-191.
4. ฟู, เอฟ., และคณะ, กรดเรตินอยด์แบบอัลล-ทรานส์ กระตุ้นการแยกตัวของเซลล์ P19 ไปเป็นเซลล์ประสาทที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/Akt/GSK3β. วารสารชีวเคมีระดับเซลล์, 2020. 121(11): หน้า 4386-4396.
5. เจียง, ย., และคณะ, ระยะยาวที่ไม่เข้ารหัส RNA SNHG6 มีส่วนช่วยในการก่อตัวของผนังกั้นหัวใจห้องล่างผิดปกติผ่านการควบคุมเชิงลบของ miR-101 และการกระตุ้นเส้นทาง Wnt/β-catenin. Die Pharmazie-วารสารนานาชาติด้านวิทยาศาสตร์เภสัชกรรม, 2019. 74(1): หน้า 23-28
6. กมเกตุ, น., และคณะ, สารสกัดน้ำจากเมล็ด Mucuna pruriens ปรับปรุงผลในการปกป้องระบบประสาทและยับยั้งเอนไซม์อะเซติลโคลีนเอสเตอเรสเมื่อเปรียบเทียบกับ L-dopa สังเคราะห์. โมเลกุล, 2022. 27(10): หน้า 3131.