İçeriğe atla
Ana-1
Doku
Kemik iliği
Eş anlamlılar
ANA-1, ANA1

Ana-1

Cell line · Ürün numarası 305172

The Ana-1 cell line is a murine macrophage cell line derived from the ascites of a BALB/c mouse with a methylcholanthrene-induced tumor. This cell line is...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Ana-1 hücre hattı, metilkolantren kaynaklı bir tümör bulunan BALB/c faresinin asitinden elde edilen bir fare makrofaj hücre hattıdır. Bu hücre hattı, çeşitli sitokinler üretme kabiliyeti ve doğuştan gelen bağışıklık tepkisinde oynadığı rol nedeniyle immünolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Ana-1 hücreleri fagositik aktivite gösterir ve patojenlere ve tümör hücrelerine karşı sitotoksik yanıt için hayati önem taşıyan nitrik oksit (NO) üretebilir.

Ayrıca, Ana-1 hücreleri, makrofaj aktivasyonunu ve bağışıklık tepkilerinde rol oynayan sinyal yollarını incelemek için bir model sistem olarak kullanılmaktadır. Hücreler, lipopolisakkarit (LPS) uyarımına proinflamatuar sitokinlerin ekspresyonunu yukarı doğru düzenleyerek yanıt verirler; bu da onları inflamasyonun ve konakçı savunma sisteminin moleküler mekanizmalarının araştırılması için uygun hale getirir. Çeşitli immünolojik testlerle uyumlulukları da onları ilaç taraması ve immün sistemdeki diğer hücre tipleriyle makrofaj etkileşimlerini anlamak için değerli kılar.

Doku
Kemik iliği
Eş anlamlılar
  • ANA-1
  • ANA1

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Makrofaj

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Ana-1 (Cytion katalog numarası 305172)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0142

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 ısıyla inaktive edilmiş FBS ile destekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 ila 4 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6