Ana-1
Cell line · Product number 305172
The Ana-1 cell line is a murine macrophage cell line derived from the ascites of a BALB/c mouse with a methylcholanthrene-induced tumor. This cell line is...
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01General information
- Description
A linhagem celular Ana-1 é uma linhagem de macrófagos murinos derivada da ascite de um camundongo BALB/c com um tumor induzido por metilcolantreno. Essa linhagem celular é amplamente utilizada em pesquisas imunológicas devido à sua capacidade de produzir uma variedade de citocinas e ao seu papel na resposta imune inata. As células Ana-1 apresentam atividade fagocítica e são capazes de produzir óxido nítrico (NO), que é crucial para a resposta citotóxica contra patógenos e células tumorais.
Além disso, as células Ana-1 têm sido empregadas como um sistema-modelo para estudar a ativação de macrófagos e as vias de sinalização envolvidas nas respostas imunológicas. As células respondem à estimulação por lipopolissacarídeo (LPS) regulando positivamente a expressão de citocinas pró-inflamatórias, o que as torna adequadas para investigações sobre os mecanismos moleculares da inflamação e do sistema de defesa do hospedeiro. Sua compatibilidade com diversos ensaios imunológicos também as torna valiosas para a triagem de medicamentos e para a compreensão das interações dos macrófagos com outros tipos de células do sistema imunológico.
- Tissue
- Medula óssea
- Synonyms
- ANA-1
- ANA1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent and suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Macrófago
04Identifiers
- Citation
- Ana-1 (número de catálogo da Cytion 305172)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0142
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Recolha as células em suspensão em um tubo de 15 ml e lave delicadamente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (use 3 a 5 ml para frascos T25 e 5 a 10 ml para frascos T75). Aplique Accutase (1 a 2 ml para frascos T25, 2,5 ml para frascos T75), garantindo a cobertura total da camada celular. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 10 minutos. Após a incubação, combine e centrifugue tanto a suspensão quanto as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspenda cuidadosamente o sedimento celular e transfira a suspensão celular para novos frascos contendo meio fresco.
- Seeding density
- 2 a 4 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
