Ana-1
Cell line · Tuotenumero 305172
The Ana-1 cell line is a murine macrophage cell line derived from the ascites of a BALB/c mouse with a methylcholanthrene-induced tumor. This cell line is...
Räätälöinti / Suositukset
- Ana-1Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
Ana-1-solulinja on hiiren makrofagisolulinja, joka on peräisin metyylikolantreenin aiheuttamaa kasvainta sairastavan BALB/c-hiiren askitesnesteestä. Tätä solulinjaa käytetään laajasti immunologisessa tutkimuksessa, koska se kykenee tuottamaan monenlaisia sytokiineja ja sillä on tärkeä rooli luontaisessa immuunivasteessa. Ana-1-solut osoittavat fagosyyttistä aktiivisuutta ja kykenevät tuottamaan typpioksidia (NO), joka on ratkaisevan tärkeää sytotoksiselle vasteelle patogeenejä ja kasvainsoluja vastaan.
Lisäksi Ana-1-soluja on käytetty mallijärjestelmänä makrofagien aktivaation ja immuunivasteisiin liittyvien signalointireittien tutkimuksessa. Solut reagoivat lipopolysakkaridi (LPS) -stimulaatioon säätelemällä proinflammatoristen sytokiinien ilmentymistä ylöspäin, mikä tekee niistä sopivia tulehduksen ja isäntäorganismien puolustusjärjestelmän molekyylimekanismien tutkimiseen. Niiden yhteensopivuus erilaisten immunologisten määritysten kanssa tekee niistä arvokkaita myös lääkeaineiden seulonnassa ja makrofagien vuorovaikutuksen ymmärtämisessä muiden immuunijärjestelmän solutyyppien kanssa.
- Kudos
- Luuydin
- Synonyymit
- ANA-1
- ANA1
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Kasvuominaisuudet
- Adheesio ja suspensio
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Makrofagit
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- Ana-1 (Cytion-tuotenumero 305172)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0142
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 2–4 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- C57BL/6
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
