Gå direkt till innehållet
Ana-1
Vävnad
Benmärg
Synonymer
ANA-1, ANA1

Ana-1

Cell line · Produktnummer 305172

The Ana-1 cell line is a murine macrophage cell line derived from the ascites of a BALB/c mouse with a methylcholanthrene-induced tumor. This cell line is...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Ana-1-cellinjen är en murin makrofagcellinje som härrör från ascites från en BALB/c-mus med en metylkolantreninducerad tumör. Denna cellinje används i stor utsträckning inom immunologisk forskning på grund av dess förmåga att producera en mängd olika cytokiner och dess roll i det medfödda immunsvaret. Ana-1-celler uppvisar fagocyterande aktivitet och kan producera kväveoxid (NO), vilket är avgörande för det cytotoxiska svaret mot patogener och tumörceller.

Ana-1-celler har dessutom använts som ett modellsystem för att studera makrofagaktivering och de signalvägar som är involverade i immunsvaret. Cellerna svarar på stimulering med lipopolysackarid (LPS) genom att uppreglera uttrycket av proinflammatoriska cytokiner, vilket gör dem lämpliga för undersökningar av de molekylära mekanismerna bakom inflammation och värdens försvarssystem. Deras kompatibilitet med olika immunologiska analyser gör dem också värdefulla för läkemedelsscreening och för att förstå makrofagernas interaktioner med andra celltyper i immunsystemet.

Vävnad
Benmärg
Synonymer
  • ANA-1
  • ANA1

02Klassificering

Organism
Mus
Tillväxtegenskaper
Adhärens och suspension
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Makrofag

04Identifierare

Källa
Ana-1 (Cytion katalognummer 305172)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0142

05Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% värmeinaktiverad FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
C57BL/6