Skip to content
Ana-1
Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
ANA-1, ANA1

Documents

Ana-1

Cell line · Product number 305172

The Ana-1 cell line is a murine macrophage cell line derived from the ascites of a BALB/c mouse with a methylcholanthrene-induced tumor. This cell line is...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Ana-1 เป็นเซลล์ไลน์มาโครฟาจของหนูที่ได้มาจากน้ำในช่องท้องของหนู BALB/c ที่ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดเนื้องอกด้วยเมทิลโคลันเธน เซลล์ไลน์นี้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยด้านภูมิคุ้มกัน เนื่องจากความสามารถในการผลิตไซโตไคน์หลากหลายชนิดและมีบทบาทในการตอบสนองภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ เซลล์ Ana-1 แสดงกิจกรรมการกินเซลล์ (phagocytic activity) และสามารถผลิตไนตริกออกไซด์ (NO) ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการตอบสนองทางพิษต่อเซลล์ (cytotoxic response) ต่อเชื้อโรคและเซลล์มะเร็ง

นอกจากนี้ เซลล์ Ana-1 ยังถูกนำมาใช้เป็นระบบต้นแบบในการศึกษาการกระตุ้นแมคโครฟาจและเส้นทางสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน เซลล์ตอบสนองต่อการกระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) โดยการเพิ่มการแสดงออกของไซโตไคน์ที่กระตุ้นการอักเสบ ทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมสำหรับการศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกโมเลกุลของการอักเสบและระบบป้องกันของโฮสต์ ความเข้ากันได้กับวิธีการทดสอบทางภูมิคุ้มกันที่หลากหลายยังทำให้เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าสำหรับการคัดกรองยาและการทำความเข้าใจปฏิสัมพันธ์ระหว่างแมคโครฟาจกับเซลล์ชนิดอื่นในระบบภูมิคุ้มกัน

Tissue
ไขกระดูก
Synonyms
  • ANA-1
  • ANA1

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
มาโครฟาจ

04Identifiers

Citation
Ana-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305172)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0142

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
C57BL/6