HEp-2

La línea celular HEp-2, que originalmente se creía derivada de células de cáncer de laringe, fue identificada posteriormente, mediante el análisis de huellas genéticas y la presencia de cromosomas marcadores de HeLa, como contaminada con células HeLa, una línea celular derivada del cáncer de cuello uterino.

A pesar de ello, la línea celular HEp-2 sigue utilizándose ampliamente en la inmunofluorescencia indirecta para detectar anticuerpos antinucleares (ANA), que son clave en el diagnóstico de afecciones como el lupus eritematoso sistémico y la esclerosis sistémica. El ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IIFA) con células HEp-2, que proporciona resultados claramente positivos o negativos, es el método estándar para detectar anticuerpos antinucleares. Este enfoque sencillo es crucial para diagnosticar y clasificar diferentes enfermedades autoinmunes sistémicas.

Los patrones de autoanticuerpos observados en la inmunofluorescencia indirecta en células HEp-2, especialmente en el contexto de la reumatología, brindan información invaluable sobre diversas enfermedades reumáticas. Además, la revisión exhaustiva de los antígenos expresados por las células humanas HEp-2 bajo diferentes condiciones de cultivo permite la identificación de ANA específicos relacionados con enfermedades como el lupus.

En conclusión, si bien la contaminación de líneas celulares como la HEp-2 con células HeLa ha suscitado inquietudes en la investigación del cáncer respecto a la precisión y confiabilidad de los resultados y su relevancia clínica, la utilidad de la HEp-2 en la detección de anticuerpos antinucleares y su aplicación en diversas disciplinas de investigación subrayan su importancia continua. La línea celular HEp-2 sirve como una herramienta esencial en el diagnóstico y la clasificación de enfermedades autoinmunes, entre otras aplicaciones.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.