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HEp-2
Tissue
喉頭
Disease
腺癌
Synonyms
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

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HEp-2

Cell line · Product number 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

HEp-2 細胞系最初被認為源自喉癌細胞,但後來透過 DNA 指紋分析及檢測到 HeLa 標記染色體的存在,確認其已受到源自子宮頸癌的 HeLa 細胞污染。

儘管如此,HEp-2 細胞系仍廣泛應用於間接免疫螢光法,用於檢測抗核抗體(ANAs),此項檢測對於診斷系統性紅斑狼瘡和系統性硬化症等疾病至關重要。 採用 HEp-2 細胞進行的間接免疫螢光法(IIFA)能提供明確的陽性或陰性結果,是檢測抗核抗體的標準方法。這種簡便的方法對於診斷和分類各種系統性自體免疫疾病至關重要。

在 HEp-2 細胞上進行間接免疫螢光檢測所觀察到的自身抗體圖案,特別是在風濕病學的背景下,為各種風濕性疾病提供了極其寶貴的見解。此外,對 HEp-2 人細胞在不同培養條件下所表達的抗原進行全面綜述,有助於識別與紅斑狼瘡等疾病相關的特定抗核抗體。

總而言之,儘管 HEp-2 等細胞系受到 HeLa 細胞的污染,已在癌症研究領域引發對結果準確性、可靠性及其臨床相關性的擔憂,但 HEp-2 在檢測抗核抗體方面的實用性,以及其在各研究領域的廣泛應用,均凸顯了其持續的重要性。 HEp-2 細胞系不僅用於診斷和分類自體免疫疾病,更在其他應用領域中扮演著不可或缺的角色。

Tissue
喉頭
Disease
腺癌
Applications
在風濕病學領域中,利用 HEp-2 細胞進行的間接免疫螢光法,在診斷自體免疫疾病(包括系統性紅斑狼瘡及系統性硬化症)方面扮演著關鍵角色
Synonyms
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣

04Identifiers

Citation
HEp-2(Cytion 型號 300397)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1906

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, A
Reverse transcriptase
否
Products
角蛋白

06Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
30年
Ethnicity
非裔美國人