Skip to content
HEp-2
Tissue
กล่องเสียง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Documents

HEp-2

Cell line · Product number 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ HEp-2 ซึ่งเดิมเชื่อว่ามีต้นกำเนิดจากเซลล์มะเร็งกล่องเสียง ได้ถูกระบุในภายหลังผ่านการตรวจสอบลายนิ้วมือดีเอ็นเอและการพบโครโมโซมเครื่องหมาย HeLa ว่ามีการปนเปื้อนของเซลล์ HeLa ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์ที่มีต้นกำเนิดจากมะเร็งปากมดลูก

แม้กระนั้น สายเซลล์ HEp-2 ยังคงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมเพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อนิวเคลียสของเซลล์ (ANAs) ซึ่งเป็นตัวชี้วัดสำคัญในการวินิจฉัยโรคต่าง ๆ เช่น โรคลูปัสอิริทีมาโตซัสระบบและโรคสเคลอโรซิสระบบการทดสอบอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อม (IIFA) โดยใช้เซลล์ HEp-2 ซึ่งให้ผลการทดสอบที่ชัดเจนว่าเป็นบวกหรือลบ เป็นวิธีมาตรฐานสำหรับการตรวจหาแอนติบอดีต่อนิวเคลียร์ วิธีที่ตรงไปตรงมานี้มีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการวินิจฉัยและจำแนกโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเองแบบระบบต่างๆ

รูปแบบของแอนติบอดีต่อตนเองที่พบในการตรวจอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมบนเซลล์ HEp-2 โดยเฉพาะในบริบทของโรคข้อและรูมาติกส์ ให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีคุณค่าอย่างยิ่งต่อโรคข้อและรูมาติกส์หลากหลายชนิด นอกจากนี้ การทบทวนอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับแอนติเจนที่แสดงออกโดยเซลล์มนุษย์ HEp-2 ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงที่แตกต่างกัน ยังช่วยให้สามารถระบุแอนติบอดีต่อตนเอง (ANA) ที่เฉพาะเจาะจงซึ่งเชื่อมโยงกับโรค เช่น โรคลูปัส ได้อีกด้วย

โดยสรุป แม้ว่าการปนเปื้อนของเซลล์ไลน์เช่น HEp-2 ด้วยเซลล์ HeLa จะก่อให้เกิดความกังวลในวงการวิจัยมะเร็งเกี่ยวกับความถูกต้องและความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ รวมถึงความเกี่ยวข้องทางคลินิก แต่ประโยชน์ของ Hep-2 ในการตรวจหาแอนติบอดีต่อนิวเคลียสของเซลล์และการประยุกต์ใช้ในหลากหลายสาขาวิจัยยังคงเน้นย้ำถึงความสำคัญอย่างต่อเนื่อง เซลล์ไลน์ HEp-2 ทำหน้าที่เป็นเครื่องมือสำคัญในการวินิจฉัยและจำแนกโรคภูมิต้านตนเอง รวมถึงการประยุกต์ใช้ในด้านอื่นๆ

Tissue
กล่องเสียง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Applications
ในโรคข้อและรูมาติสซั่ม การตรวจภูมิคุ้มกันฟลูออเรสเซนซ์ทางอ้อมโดยใช้เซลล์ HEp-2 มีบทบาทสำคัญในการวินิจฉัยโรคภูมิต้านทานตนเอง รวมถึงโรคเอสแอลอี (Systemic Lupus Erythematosus) และโรคสเคลอโรซิส (Systemic Sclerosis)
Synonyms
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
HEp-2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300397)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1906

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, เอ
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
30 ปี
Ethnicity
แอฟริกันอเมริกัน