Skip to content
HEp-2
Tissue
גרון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Documents

HEp-2

Cell line · Product number 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים HEp-2, שנחשב במקור כנגזר מתאי סרטן הגרון, זוהה מאוחר יותר באמצעות טביעת אצבעות DNA ונוכחות כרומוזומים מסומנים HeLa כנגוע בתאי HeLa, קו תאים שנגזר מסרטן צוואר הרחם.

למרות זאת, קו התאים HEp-2 ממשיך לשמש באופן נרחב באימונופלואורסצנציה עקיפה לזיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA), המהווים מרכיב מרכזי באבחון מחלות כמו זאבת אדמנתית מערכתית וסקלרודרמה מערכתית. בדיקת האימונופלואורסצנציה העקיפה (IIFA) המשתמשת בתאי HEp-2, המספקת תוצאות חיוביות או שליליות ברורות, היא השיטה הסטנדרטית לבדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים. גישה פשוטה זו היא חיונית לאבחון וסיווג מחלות אוטואימוניות מערכתיות שונות.

דפוסי הנוגדנים העצמיים שנצפו באימונופלואורסצנציה עקיפה בתאי HEp-2, במיוחד בהקשר של ראומטולוגיה, מספקים תובנות יקרות ערך על מחלות ראומטיות שונות. יתר על כן, הסקירה המקיפה של אנטיגנים המובעים על ידי תאי HEp-2 אנושיים בתנאי תרבית שונים מאפשרת זיהוי של נוגדנים אנטי-גרעיניים ספציפיים הקשורים למחלות כמו זאבת.

לסיכום, בעוד שהזיהום של קווי תאים כמו HEp-2 בתאי HeLa עורר חששות במחקר הסרטן לגבי הדיוק והאמינות של התוצאות והרלוונטיות הקלינית שלהן, השימושיות של Hep-2 בזיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים ויישומה במגוון תחומי מחקר מדגישים את חשיבותה המתמשכת. קו התאים HEp-2 משמש ככלי חיוני באבחון וסיווג מחלות אוטואימוניות, בין יישומים אחרים.

Tissue
גרון
Disease
אדנוקרצינומה
Applications
ברפואת ראומטולוגיה, אימונופלואורסצנציה עקיפה באמצעות תאי HEp-2 ממלאת תפקיד מכריע באבחון מחלות אוטואימוניות, כולל זאבת אדמנתית מערכתית וסקלרודרמה מערכתית
Synonyms
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
HEp-2 (מספר קטלוגי Cytion 300397)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1906

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, A
Reverse transcriptase
שלילי
Products
קרטין

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
30 שנה
Ethnicity
אפרו-אמריקאי