
- Tissue
- גרון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2
Documents
HEp-2
Cell line · Product number 300397
The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים HEp-2, שנחשב במקור כנגזר מתאי סרטן הגרון, זוהה מאוחר יותר באמצעות טביעת אצבעות DNA ונוכחות כרומוזומים מסומנים HeLa כנגוע בתאי HeLa, קו תאים שנגזר מסרטן צוואר הרחם.
למרות זאת, קו התאים HEp-2 ממשיך לשמש באופן נרחב באימונופלואורסצנציה עקיפה לזיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים (ANA), המהווים מרכיב מרכזי באבחון מחלות כמו זאבת אדמנתית מערכתית וסקלרודרמה מערכתית. בדיקת האימונופלואורסצנציה העקיפה (IIFA) המשתמשת בתאי HEp-2, המספקת תוצאות חיוביות או שליליות ברורות, היא השיטה הסטנדרטית לבדיקת נוגדנים אנטי-גרעיניים. גישה פשוטה זו היא חיונית לאבחון וסיווג מחלות אוטואימוניות מערכתיות שונות.
דפוסי הנוגדנים העצמיים שנצפו באימונופלואורסצנציה עקיפה בתאי HEp-2, במיוחד בהקשר של ראומטולוגיה, מספקים תובנות יקרות ערך על מחלות ראומטיות שונות. יתר על כן, הסקירה המקיפה של אנטיגנים המובעים על ידי תאי HEp-2 אנושיים בתנאי תרבית שונים מאפשרת זיהוי של נוגדנים אנטי-גרעיניים ספציפיים הקשורים למחלות כמו זאבת.
לסיכום, בעוד שהזיהום של קווי תאים כמו HEp-2 בתאי HeLa עורר חששות במחקר הסרטן לגבי הדיוק והאמינות של התוצאות והרלוונטיות הקלינית שלהן, השימושיות של Hep-2 בזיהוי נוגדנים אנטי-גרעיניים ויישומה במגוון תחומי מחקר מדגישים את חשיבותה המתמשכת. קו התאים HEp-2 משמש ככלי חיוני באבחון וסיווג מחלות אוטואימוניות, בין יישומים אחרים.
- Tissue
- גרון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Applications
- ברפואת ראומטולוגיה, אימונופלואורסצנציה עקיפה באמצעות תאי HEp-2 ממלאת תפקיד מכריע באבחון מחלות אוטואימוניות, כולל זאבת אדמנתית מערכתית וסקלרודרמה מערכתית
- Synonyms
- Hep-2
- HEP-2
- HEp-2/HeLa
- Hep 2
- Hep2
- HEp2
- HEP2
- H.Ep.-2
- H.Ep. #2
- H.Ep. No. 2
- Hep II
- Human Epidermoid carcinoma #2
- Human Epithelioma-2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HEp-2 (מספר קטלוגי Cytion 300397)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1906
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD, A
- Reverse transcriptase
- שלילי
- Products
- קרטין
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 30 שנה
- Ethnicity
- אפרו-אמריקאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes