Skip to content
HEp-2
Tissue
Hộp thanh quản
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
Hep-2, HEP-2, HEp-2/HeLa, Hep 2, Hep2, HEp2, HEP2, H.Ep.-2, H.Ep. #2, H.Ep. No. 2, Hep II, Human Epidermoid carcinoma #2, Human Epithelioma-2

Documents

HEp-2

Cell line · Product number 300397

The HEp-2 cell line, originally believed to be derived from laryngeal cancer cells, was later identified through DNA fingerprinting and the presence of He...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào HEp-2, ban đầu được cho là có nguồn gốc từ tế bào ung thư thanh quản, sau đó được xác định thông qua phân tích vân tay DNA và sự hiện diện của nhiễm sắc thể dấu hiệu HeLa là bị nhiễm tế bào HeLa, một dòng tế bào có nguồn gốc từ ung thư cổ tử cung.

Mặc dù vậy, dòng tế bào HEp-2 vẫn được sử dụng rộng rãi trong xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang gián tiếp để phát hiện kháng thể chống nhân (ANAs), là yếu tố quan trọng trong chẩn đoán các bệnh như lupus ban đỏ hệ thống và xơ cứng hệ thống. Phương pháp miễn dịch huỳnh quang gián tiếp (IIFA) sử dụng dòng tế bào HEp-2, cung cấp kết quả dương tính hoặc âm tính rõ ràng, là phương pháp tiêu chuẩn để xét nghiệm kháng thể kháng nhân. Phương pháp đơn giản này rất quan trọng trong chẩn đoán và phân loại các bệnh tự miễn hệ thống khác nhau.

Các mẫu hình của kháng thể tự miễn quan sát được trong xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang gián tiếp trên tế bào HEp-2, đặc biệt trong lĩnh vực rheumatology, cung cấp những thông tin quý giá về các bệnh lý rheumatic. Hơn nữa, việc đánh giá toàn diện các kháng nguyên được biểu hiện bởi tế bào HEp-2 người dưới các điều kiện nuôi cấy khác nhau cho phép xác định các kháng thể kháng nhân cụ thể liên quan đến các bệnh như lupus.

Tóm lại, mặc dù sự nhiễm bẩn của các dòng tế bào như HEp-2 với tế bào HeLa đã gây lo ngại trong nghiên cứu ung thư về độ chính xác, độ tin cậy của kết quả và tính ứng dụng lâm sàng của chúng, tính hữu ích của HEp-2 trong việc phát hiện kháng thể kháng nhân và ứng dụng của nó trong các lĩnh vực nghiên cứu khác nhau nhấn mạnh tầm quan trọng tiếp tục của nó. Dòng tế bào HEp-2 đóng vai trò là công cụ thiết yếu trong chẩn đoán và phân loại các bệnh tự miễn, cùng với các ứng dụng khác.

Tissue
Hộp thanh quản
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Applications
Trong lĩnh vực rheumatology, kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp sử dụng tế bào HEp-2 đóng vai trò quan trọng trong chẩn đoán các bệnh tự miễn, bao gồm lupus ban đỏ hệ thống và xơ cứng hệ thống
Synonyms
  • Hep-2
  • HEP-2
  • HEp-2/HeLa
  • Hep 2
  • Hep2
  • HEp2
  • HEP2
  • H.Ep.-2
  • H.Ep. #2
  • H.Ep. No. 2
  • Hep II
  • Human Epidermoid carcinoma #2
  • Human Epithelioma-2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô

04Identifiers

Citation
HEp-2 (Số catalog Cytion 300397)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1906

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, A
Reverse transcriptase
Tiêu cực
Products
Keratin

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
30 năm
Ethnicity
Người Mỹ gốc Phi