HEp-2

La lignée cellulaire HEp-2, que l’on croyait à l’origine dérivée de cellules cancéreuses du larynx, a par la suite été identifiée, grâce à l’empreinte génétique et à la présence de chromosomes marqueurs HeLa, comme étant contaminée par des cellules HeLa, une lignée cellulaire dérivée d’un cancer du col de l’utérus.

Malgré cela, la lignée cellulaire HEp-2 continue d’être largement utilisée en immunofluorescence indirecte pour détecter les anticorps antinucléaires (ANA), qui jouent un rôle clé dans le diagnostic de maladies telles que le lupus érythémateux systémique et la sclérose systémique. Le test d’immunofluorescence indirecte (IIFA) utilisant des cellules HEp-2, qui fournit des résultats positifs ou négatifs clairs, est la méthode standard pour le dépistage des anticorps antinucléaires. Cette approche simple est cruciale pour le diagnostic et la classification de différentes maladies auto-immunes systémiques.

Les profils d’auto-anticorps observés par immunofluorescence indirecte sur les cellules HEp-2, en particulier en rhumatologie, fournissent des informations inestimables sur diverses maladies rhumatismales. De plus, l’analyse exhaustive des antigènes exprimés par les cellules humaines HEp-2 dans différentes conditions de culture permet d’identifier des ANA spécifiques associés à des maladies comme le lupus.

En conclusion, bien que la contamination de lignées cellulaires telles que HEp-2 par des cellules HeLa ait suscité des inquiétudes dans le domaine de la recherche sur le cancer quant à l’exactitude et à la fiabilité des résultats ainsi qu’à leur pertinence clinique, l’utilité de HEp-2 dans la détection des anticorps antinucléaires et son application dans diverses disciplines de recherche soulignent son importance persistante. La lignée cellulaire HEp-2 constitue un outil essentiel pour le diagnostic et la classification des maladies auto-immunes, entre autres applications.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.