Lec1

La línea celular Lec1 es un clon mutante seleccionado por su resistencia a la aglutinina del germen de trigo, derivado del clon CHO parental Pro-5. Este proceso de selección dio como resultado una línea celular con un defecto específico de glicosilación, caracterizada por la presencia de carbohidratos N-ligados con un intermediario Man5-GlcNAc2-Asn bloqueado. Este bloqueo se debe a la ausencia de N-acetilglucosaminiltransferasa I (GlcNAc-TI), una enzima fundamental para que la síntesis de glicanos avance hacia formas más complejas. Como resultado, las células Lec1 acumulan glicoproteínas con oligosacáridos truncados de tipo alto en manosa.

Las células Lec1 son de gran valor para el estudio de la biosíntesis de glicoproteínas, particularmente para comprender cómo la glicosilación N-ligada alterada afecta la función celular. Los investigadores utilizan las células Lec1 para investigar el impacto de la glicosilación en el plegamiento de proteínas, la estabilidad, la función de los receptores y el tráfico intracelular. Además, estas células ofrecen una plataforma única para estudiar la compartimentación de las glicoproteínas endógenas inducidas por infecciones virales o por la transfección de ADN extraño. Las estructuras de glicanos simplificadas en las células Lec1 también las hacen ideales para producir glicoproteínas que son más fáciles de analizar en diversos contextos experimentales.

Se utilizan principalmente in vitro para estudios de mecanismos y aplicaciones biotecnológicas relacionadas con la producción y el análisis de glicoproteínas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.