Lec1

สายเซลล์ Lec1 เป็นโคลนกลายพันธุ์ที่ถูกคัดเลือกเนื่องจากความต้านทานต่อ wheat germ agglutinin ซึ่งได้มาจากโคลน CHO พ่อแม่ Pro-5 กระบวนการคัดเลือกนี้ส่งผลให้เกิดสายเซลล์ที่มีข้อบกพร่องเฉพาะในการเติมน้ำตาล (glycosylation) โดยมีลักษณะเด่นคือการมีคาร์โบไฮเดรตที่เชื่อมต่อกับ N-linked ซึ่งมีขั้นตอนกลางเป็น Man5-GlcNAc2-Asn ที่ถูกปิดกั้น การอุดตันนี้เกิดจากการขาดเอนไซม์ N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI) ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่สำคัญในการสังเคราะห์ไกลแคนไปสู่รูปแบบที่ซับซ้อนมากขึ้น ส่งผลให้เซลล์ Lec1 สะสมไกลโคโปรตีนที่มีโอลิโกแซคคาไรด์ชนิด high-mannose ที่ถูกตัดขาด

เซลล์ Lec1 มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการสังเคราะห์ไกลโคโปรตีน โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจว่าไกลโคซิลิเอชันแบบ N-linked ที่เปลี่ยนแปลงไปส่งผลต่อการทำงานของเซลล์อย่างไร นักวิจัยใช้เซลล์ Lec1 เพื่อศึกษาผลกระทบของการเติมน้ำตาลต่อกระบวนการพับตัวของโปรตีน ความเสถียร การทำงานของตัวรับ และการขนส่งภายในเซลล์ นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังเป็นแพลตฟอร์มเฉพาะสำหรับการศึกษาการจัดแบ่งส่วนของไกลโคโปรตีนภายในเซลล์ที่เกิดจากไวรัสหรือการถ่ายโอนดีเอ็นเอแปลกปลอมเข้าสู่เซลล์ ไกลแคนที่มีโครงสร้างเรียบง่ายในเซลล์ Lec1 ยังทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการผลิตไกลโคโปรตีนที่วิเคราะห์ได้ง่ายขึ้นในบริบทการทดลองที่หลากหลาย

พวกมันถูกใช้เป็นหลักในหลอดทดลองสำหรับการศึกษาเชิงกลไกและการประยุกต์ใช้ทางเทคโนโลยีชีวภาพที่เกี่ยวข้องกับการผลิตและการวิเคราะห์ไกลโคโปรตีน

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.