Skip to content
Lec1
Tissue
שחלה
Synonyms
CHO-Lec1, CHO Lec1, Pro-Lec1.3C, Pro-5 Lec1.3c, Pro-5WgaRI3C

Documents

Lec1

Cell line · Product number 305010

The Lec1 cell line is a mutant clone selected for its resistance to wheat germ agglutinin, derived from the parental CHO clone Pro-5. This selection proce...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים Lec1 הוא שיבוט מוטנטי שנבחר בשל עמידותו לאגלוטינין מנבט חיטה, הנגזר מהשיבוט ההורי Pro-5 של CHO. תהליך הבחירה הוביל ליצירת קו תאים עם פגם ספציפי בגליקוזילציה, המתאפיין בנוכחות פחמימות מקושרות-N עם ביניים חסום מסוג Man5-GlcNAc2-Asn. חסימה זו נובעת מהיעדר N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI), אנזים חיוני להתקדמות סינתזת הגליקנים לצורות מורכבות יותר. כתוצאה מכך, תאי Lec1 צוברים גליקופרוטאינים עם אוליגוסכרידים מקוצצים מסוג מנוס גבוה.

תאי Lec1 הם בעלי ערך רב לחקר הביוסינתזה של גליקופרוטאינים, במיוחד בהבנת האופן שבו גליקוזילציה מקושרת-N משונה משפיעה על תפקוד התא. חוקרים משתמשים בתאי Lec1 כדי לחקור את ההשפעה של גליקוזילציה על קיפול חלבונים, יציבות, תפקוד קולטנים ותנועה תאיית. בנוסף, תאים אלה מספקים פלטפורמה ייחודית לחקר החלוקה לתאים של גליקופרוטאינים אנדוגניים המושרה על ידי זיהום נגיפי או על ידי טרנספקציה של DNA זר. מבני הגליקנים הפשוטים בתאי Lec1 הופכים אותם לאידיאליים לייצור גליקופרוטאינים שקל יותר לנתח בהקשרים ניסויים שונים.

תאים אלה משמשים בעיקר במבחנה למחקרים מכניים וליישומים ביוטכנולוגיים הקשורים לייצור וניתוח גליקופרוטאינים.

Tissue
שחלה
Synonyms
  • CHO-Lec1
  • CHO Lec1
  • Pro-Lec1.3C
  • Pro-5 Lec1.3c
  • Pro-5WgaRI3C

02Classification

Organism
Chinese hamster
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
Lec1 (מספר קטלוגי של Cytion: 305010)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_3440

05Handling and culture

Culture medium
אלפא MEM, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w/o: ריבונוקליאוסידים, w/o: דוקסיריבונוקליאוסידים, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2g/L NaHCO3
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
מבוגר