Lec1
Cell line · Product number 305010
The Lec1 cell line is a mutant clone selected for its resistance to wheat germ agglutinin, derived from the parental CHO clone Pro-5. This selection proce...
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01General information
- Description
Lec1细胞系是从亲本CHO克隆Pro-5中筛选出的、对小麦胚芽凝集素具有抗性的突变克隆。这一筛选过程产生了一种具有特定糖基化缺陷的细胞系,其特征在于存在N-连接糖链,且其中Man5-GlcNAc2-Asn中间体被阻断。 这种阻滞是由于缺乏 N-乙酰葡糖胺基转移酶 I(GlcNAc-TI)所致,该酶对于糖链合成向更复杂形式的发展至关重要。因此,Lec1 细胞中积累了具有截短型高甘露糖寡糖的糖蛋白。
Lec1 细胞对于糖蛋白生物合成研究具有不可估量的价值,特别是在理解 N-连接糖基化改变如何影响细胞功能方面。 研究人员利用 Lec1 细胞探究糖基化对蛋白质折叠、稳定性、受体功能及细胞内转运的影响。此外,这些细胞还为研究病毒感染或外源 DNA 转染诱导的内源性糖蛋白的区室化提供了独特平台。Lec1 细胞中简化的糖链结构也使其成为生产糖蛋白的理想选择,这些糖蛋白在各种实验背景下更易于分析。
该细胞主要用于体外机制研究,以及涉及糖蛋白生产与分析的生物技术应用。
- Tissue
- 卵巢
- Synonyms
- CHO-Lec1
- CHO Lec1
- Pro-Lec1.3C
- Pro-5 Lec1.3c
- Pro-5WgaRI3C
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮细胞
04Identifiers
- Citation
- Lec1(Cytion 产品编号 305010)
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_3440
05Handling and culture
- Culture medium
- 阿尔法 MEM,含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,不含:2.0 mM 稳定谷氨酰胺:不含核糖核苷,不含脱氧核糖核苷:脱氧核苷,含 1.0 毫摩尔丙酮酸钠,含 2.2 克/升 NaHCO3
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 2至4×10⁴个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 成人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes