Skip to content
Lec1
Tissue
Buồng trứng
Synonyms
CHO-Lec1, CHO Lec1, Pro-Lec1.3C, Pro-5 Lec1.3c, Pro-5WgaRI3C

Documents

Lec1

Cell line · Product number 305010

The Lec1 cell line is a mutant clone selected for its resistance to wheat germ agglutinin, derived from the parental CHO clone Pro-5. This selection proce...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào Lec1 là một dòng đột biến được chọn lọc dựa trên khả năng kháng lại chất kết tụ mầm lúa mì (wheat germ agglutinin), có nguồn gốc từ dòng CHO gốc Pro-5. Quá trình chọn lọc này đã tạo ra một dòng tế bào có khiếm khuyết cụ thể trong quá trình glycosyl hóa, được đặc trưng bởi sự hiện diện của các carbohydrate liên kết N với một trung gian Man5-GlcNAc2-Asn bị chặn lại. Sự tắc nghẽn này là do thiếu N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI), một enzym quan trọng cho quá trình tổng hợp glycan thành các dạng phức tạp hơn. Kết quả là, các tế bào Lec1 tích tụ các glycoprotein có oligosaccharide loại mannoza cao bị cắt ngắn.

Tế bào Lec1 là công cụ vô giá trong nghiên cứu tổng hợp glycoprotein, đặc biệt là để hiểu cách thức glycosylation liên kết N bị thay đổi ảnh hưởng đến chức năng tế bào. Các nhà nghiên cứu sử dụng tế bào Lec1 để điều tra tác động của quá trình glycosyl hóa đối với sự gấp nếp protein, độ ổn định, chức năng thụ thể và vận chuyển nội bào. Ngoài ra, các tế bào này cung cấp một nền tảng độc đáo để nghiên cứu sự phân vùng của các glycoprotein nội sinh do nhiễm virus hoặc do chuyển gen DNA ngoại lai gây ra. Cấu trúc glycan đơn giản trong tế bào Lec1 cũng khiến chúng trở thành lựa chọn lý tưởng để sản xuất các glycoprotein dễ phân tích hơn trong các bối cảnh thí nghiệm khác nhau.

Chúng chủ yếu được sử dụng trong ống nghiệm cho các nghiên cứu cơ chế và các ứng dụng công nghệ sinh học liên quan đến sản xuất và phân tích glycoprotein.

Tissue
Buồng trứng
Synonyms
  • CHO-Lec1
  • CHO Lec1
  • Pro-Lec1.3C
  • Pro-5 Lec1.3c
  • Pro-5WgaRI3C

02Classification

Organism
Chinese hamster
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì

04Identifiers

Citation
Lec1 (Mã sản phẩm Cytion 305010)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_3440

05Handling and culture

Culture medium
Alpha MEM, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, không chứa: ribonucleosides, không chứa: deoxyribonucleosides, chứa: 1,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
Người lớn