B-LCL-CDG7
Cell line · Product number 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
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01General information
- Description
- B-LCL-CDG7 est une lignée cellulaire de lymphocytes B transformés par le virus d’Epstein-Barr (VEB), dérivée d’un jeune garçon atteint de CDAII. La CDAII est une anémie génétique rare, appartenant à la classe des troubles de la glycosylation CDG. Les patients atteints de CDAII présentent une anomalie du gène SEC23B, composante du complexe COPII, qui intervient dans le système de transport intracellulaire des protéines (en particulier le bourgeonnement vésiculaire à partir du réticulum endoplasmique). Le patient en question est homozygote pour la mutation de ce gène. La glycoprotéine de la bande 3 des membranes érythrocytaires est sous-glycosylée en raison d’une glycosylation anormale des motifs polylactosamine des glycoprotéines, mais non des glycosphingolipides; par conséquent, la bande 3 des érythrocytes atteints de CDA II présente des oligosaccharides tronqués de type hybride. Cela indique un défaut supplémentaire au niveau des enzymes de glycosylation du Golgi, la bêta-mannosidase II ou la N-acétylglucosaminyltransférase II.
- Tissue
- Sang périphérique
- Disease
- Troubles congénitaux de la glycosylation
- Applications
- Génotypage des effets de la CDG dans les cellules immunitaires, tests fonctionnels (p. ex. antigènes de surface des cellules B), évaluation de médicaments cytotoxiques, analyse des mutations, analyse des mécanismes d’apoptose, typage HLA, impact d’une glycosylation défectueuse de différentes glycoprotéines cellulaires sur diverses fonctions.
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Cellules rondes
- Cell type
- Lymphocyte B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-CDG7 (numéro de catalogue Cytion 302018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- CD15 (Lewis x)(+), CD15s (Lewis x sialylé)-, CD75s (oligosaccharides lactosaminylés sialylés)+, CD173 (groupe sanguin H)-, CD174 (groupe sanguin Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (Tn sialylé)-, CD176 (TF)+
- Antigen expression
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-, MHC de classe I+, MHC de classe II (HLA-DR)+
- Viruses
- Transformant : EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
- Subculturing
- Entretenir les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu de culture. Démarrer les cultures à une densité de 2 × 10⁵ cellules/ml et maintenir la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 1 × 10⁵ et 5 × 10⁵ cellules/ml pour une croissance optimale.
- Fluid renewal
- Une fois que la couleur moyenne est devenue jaune
- Post-thaw recovery
- Moyen
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- Enfant
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes