B-LCL-CDG7
Cell line · Product number 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
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01General information
- Description
- B-LCL-CDG7 es una línea celular de linfocitos B transformada por el virus de la mononucleosis infecciosa (EBV), derivada de un niño pequeño con CDAII. La CDAII es una anemia genética poco común, perteneciente a la clase de los trastornos de glicosilación CDG. Los pacientes con CDAII presentan un defecto en el gen SEC23B, componente del complejo COPII, que participa en el sistema de transporte intracelular de proteínas (en particular, la gemación vesicular desde el retículo endoplásmico). El paciente en cuestión es homocigoto para la mutación en este gen. La glicoproteína de la banda 3 de las membranas eritrocitarias presenta una glicosilación insuficiente debido a una glicosilación anómala de los motivos de polilactosamina de las glicoproteínas, pero no de los glicoesfingolípidos; por lo tanto, la banda 3 de los eritrocitos con CDA II presenta oligosacáridos truncados de tipo híbrido. Esto apunta a un defecto adicional en las enzimas de glicosilación del aparato de Golgi: la beta-manosidasa II o la N-acetilglucosaminiltransferasa II.
- Tissue
- Sangre periférica
- Disease
- Trastornos congénitos de la glicosilación
- Applications
- Genotipado de los efectos de la CDG en las células inmunitarias, pruebas funcionales (p. ej., antígenos de superficie de las células B), pruebas con fármacos citotóxicos, análisis de mutaciones, análisis de los mecanismos de apoptosis, tipificación del HLA, impacto de la glicosilación defectuosa de distintas glicoproteínas celulares en diversas funciones.
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas
- Cell type
- Linfocito B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-CDG7 (número de catálogo de Cytion 302018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- CD15 (Lewis x)(+), CD15s (Lewis x sialilado)-, CD75s (oligosacáridos lactosaminilados sialilados)+, CD173 (grupo sanguíneo H)-, CD174 (grupo sanguíneo Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (Tn sialilado)-, CD176 (TF)+
- Antigen expression
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0- MHC Clase I+, MHC Clase II (HLA-DR)+
- Viruses
- Transformante: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de suero fetal bovino (FBS) inactivado por calor
- Subculturing
- Mantenga los cultivos agregando o reemplazando el medio periódicamente. Inicie los cultivos con una densidad de 2 × 10⁵ células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 1 × 10⁵ a 5 × 10⁵ células/ml para lograr un crecimiento óptimo.
- Fluid renewal
- Una vez que el color medio se volvió amarillo
- Post-thaw recovery
- Medio
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- Niño
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes