B-LCL-CDG7
Cell line · Product number 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
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01General information
- Description
- B-LCL-CDG7 是一種源自一名患有 CDAII 的幼童的 EBV 轉化 B 淋巴細胞系。CDAII 是一種罕見的遺傳性貧血症,屬於 CDG 糖基化障礙類別。 CDAII 患者在 COPII 成分 SEC23B 基因上存在缺陷,該基因參與細胞內蛋白質運輸系統(特別是內質網的囊泡出芽)。該名患者在此基因上為該突變的純合子。 紅細胞膜上的第3帶糖蛋白因糖蛋白中多乳糖胺基序的異常糖基化(而非糖鞘脂)而糖基化不足,因此CDA II型紅細胞的第3帶具有截短的混合型寡糖。 這表明高爾基體的糖基化酶——β-甘露糖苷酶 II 或 N-乙醯葡萄糖胺基轉移酶 II——存在額外的缺陷。
- Tissue
- 外周血
- Disease
- 先天性糖基化異常
- Applications
- 免疫細胞中 CDG 效應的基因分型、功能檢測(例如 B 細胞表面抗原)、細胞毒性藥物檢測、突變分析、凋亡機制分析、HLA 分型,以及特定細胞糖蛋白糖基化缺陷對各種功能之影響。
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- 圓形細胞
- Cell type
- B 淋巴細胞
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-CDG7(Cytion 型號 302018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- CD15 (Lewis x)(+)、CD15s (唾液酸化 Lewis x)−、CD75s (唾液酸化乳糖胺基寡糖)+、 CD173(血型 H)-,CD174(血型 Lewis y)-,CD175(Tn)-,CD175s(唾液酸化 Tn)-,CD176(TF)+
- Antigen expression
- CD19+、CD20+、CD37+、CD43+、CD44+、CD45+、CD45R0-、MHC I類+、MHC II類(HLA-DR)+
- Viruses
- 轉化體:EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 經熱滅活的胎牛血清
- Subculturing
- 透過定期添加或更換培養基來維持培養。起始培養時,細胞密度應為 2 × 10⁵ 個細胞/毫升,並將細胞濃度維持在 1 × 10⁵ 至 5 × 10⁵ 個細胞/毫升的範圍內,以達到最佳生長效果。
- Fluid renewal
- 當那中等色調轉為黃色時
- Post-thaw recovery
- 中
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 孩子
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
