Skip to content
B-LCL-CDG7
Tissue
Máu ngoại vi
Disease
Rối loạn bẩm sinh về quá trình glycosyl hóa

Documents

B-LCL-CDG7

Cell line · Product number 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
B-LCL-CDG7 là dòng tế bào lympho B được biến đổi bởi virus Epstein-Barr (EBV), được phân lập từ một bé trai mắc bệnh CDAII. CDAII là một dạng thiếu máu di truyền hiếm gặp, thuộc nhóm rối loạn glycosyl hóa CDG. Bệnh nhân CDAII có khiếm khuyết ở gen SEC23B, một thành phần của hệ thống vận chuyển protein nội bào (đặc biệt là quá trình hình thành bào quan từ lưới nội chất). Bệnh nhân tương ứng mang đột biến đồng hợp tử trong gen này. Protein glycoprotein band 3 trên màng hồng cầu bị glycosyl hóa bất thường do glycosyl hóa sai lệch các motif polylactosamine của glycoprotein nhưng không ảnh hưởng đến glycosphingolipid, do đó band 3 của hồng cầu CDAII có các oligosaccharide dạng lai bị cắt ngắn. Điều này cho thấy có thêm một khiếm khuyết trong các enzym glycosyl hóa Golgi Beta-mannosidase II hoặc N-acetylglucosaminyltransferase II.
Tissue
Máu ngoại vi
Disease
Rối loạn bẩm sinh về quá trình glycosyl hóa
Applications
Xác định kiểu gen của các tác động CDG trong tế bào miễn dịch, thử nghiệm chức năng (ví dụ: kháng nguyên bề mặt của tế bào B), thử nghiệm thuốc gây độc tế bào, phân tích đột biến, phân tích cơ chế apoptosis, xác định kiểu gen HLA, tác động của quá trình glycosyl hóa bất thường của các glycoprotein tế bào khác nhau đối với các chức năng đa dạng.

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
Tế bào tròn
Cell type
Tế bào lympho B

04Identifiers

Citation
B-LCL-CDG7 (Số catalog Cytion 302018)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CD15 (Lewis x)(+), CD15s (Lewis x sialylated)-, CD75s (lactosaminyl Noligosccharides sialylated)+, CD173 (nhóm máu H)-, CD174 (nhóm máu Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (Tn sialylated)-, CD176 (TF)+
Antigen expression
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC Loại I+, MHC Loại II (HLA-DR)+
Viruses
Biến thể: EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò đã được khử hoạt tính bằng nhiệt
Subculturing
Bảo quản các dòng tế bào bằng cách định kỳ bổ sung hoặc thay thế môi trường nuôi cấy. Khởi tạo các dòng tế bào với mật độ 2 x 10⁵ tế bào/ml và duy trì nồng độ tế bào trong khoảng từ 1 x 10⁵ đến 5 x 10⁵ tế bào/ml để đạt được sự phát triển tối ưu.
Fluid renewal
Khi màu trung bình chuyển sang màu vàng
Post-thaw recovery
Trung bình
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Trẻ em
Ethnicity
Người da trắng