B-LCL-CDG7
Cell line · Product number 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- B-LCL-CDG7 הוא קו תאים של לימפוציטים B שעברו שינוי על ידי EBV, שמקורו בילד צעיר עם CDAII. CDAII היא אנמיה גנטית נדירה, המשתייכת לקטגוריה של הפרעות גליקוזילציה CDG. לחולים ב-CDAII יש פגם בגן SEC23B, המרכיב COPII, המעורב במערכת הובלת החלבונים התוך-תאית (בפרט התפתחות של שלפוחיות מה-ER). החולה המדובר הוא הומוזיגוטי למוטציה בגן זה. גליקופרוטאין 3 של ממברנות אריתרוציטים עובר גליקוזילציה לקויה עקב גליקוזילציה חריגה של מוטיבים פולי-לקטוזאמינים של גליקופרוטאינים, אך לא של גליקוספינגוליפידים, ולכן גליקופרוטאין 3 של אריתרוציטים עם CDA II מכיל אוליגוסכרידים מקוצצים מסוג היברידי. דבר זה מצביע על פגם נוסף באנזימי הגליקוזילציה של גולגי, בטא-מנוזידאז II או Nacetylglucosaminyltransferase II.
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- הפרעות מולדות בגליקוזילציה
- Applications
- גנוטיפ של השפעות CDG בתאי חיסון, בדיקות תפקודיות (למשל, אנטיגנים על פני תאי B), בדיקות של תרופות ציטוטוקסיות, ניתוח מוטציות, ניתוח מנגנוני אפופטוזיס, סיווג HLA, השפעת גליקוזילציה פגומה של גליקופרוטאינים תאיים שונים על תפקודים מגוונים.
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- תאים עגולים
- Cell type
- לימפוציט B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-CDG7 (מספר קטלוגי Cytion 302018)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- CD15 (לואיס x)(+), CD15s (לואיס x סיאלילי), CD75s (לקטוסאמיניל נוליגוסכרידים סיאלילי)+, CD173 (קבוצת דם H)-, CD174 (קבוצת דם לואיס y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (סיאליל Tn)-, CD176 (TF)+
- Antigen expression
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC Class.I+, MHC Class II (HLA-DR)+
- Viruses
- טרנספורמנט: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
- Subculturing
- שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 2 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 1 x 105 עד 5 x 105 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
- Fluid renewal
- ברגע שהצבע הבינוני הפך לצהוב
- Post-thaw recovery
- בינוני
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- ילד
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes