Skip to content
B-LCL-CDG7
Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
ความผิดปกติแต่กำเนิดของการเติมน้ำตาล

Documents

B-LCL-CDG7

Cell line · Product number 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
B-LCL-CDG7 เป็นสายเซลล์ลิมโฟไซต์ B ที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV ซึ่งได้มาจากเด็กชายที่มีภาวะ CDAII ภาวะ CDAII เป็นโรคโลหิตจางทางพันธุกรรมที่พบได้ยาก ซึ่งเกี่ยวข้องกับกลุ่มโรคความผิดปกติของการเติมน้ำตาลใน CDG ผู้ป่วย CDAII มีความบกพร่องในยีน SEC23B ซึ่งเป็นส่วนประกอบของ COPII ที่เกี่ยวข้องกับระบบการขนส่งโปรตีนภายในเซลล์ (โดยเฉพาะการเกิดถุงจาก ER)ผู้ป่วยรายนี้มีความผิดปกติแบบโฮโมไซกัสในยีนนี้ โปรตีนไกลโคโปรตีนแบนด์ 3 ของเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดงถูกเติมน้ำตาลอย่างผิดปกติโดยการเติมน้ำตาลที่ผิดรูปแบบของโพลีแลคโตซามีนในโมทีฟของไกลโคโปรตีน แต่ไม่เกิดขึ้นกับไกลโคสฟิงโกไลปิด ดังนั้นแบนด์ 3 ของเม็ดเลือดแดงในผู้ป่วย CDA II จะมีโอลิโกแซคคาไรด์แบบไฮบริดที่ถูกตัดทอนสิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงข้อบกพร่องเพิ่มเติมในเอนไซม์การเติมน้ำตาลของ Golgi คือ Beta-mannosidase II หรือ Nacetylglucosaminyltransferase II
Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
ความผิดปกติแต่กำเนิดของการเติมน้ำตาล
Applications
การวิเคราะห์จีโนไทป์ของผลกระทบ CDG ในเซลล์ภูมิคุ้มกัน การทดสอบการทำงาน (เช่น แอนติเจนบนผิวเซลล์ B) การทดสอบยาต้านพิษ การวิเคราะห์การกลายพันธุ์ การวิเคราะห์กลไกการตายของเซลล์ การวิเคราะห์ HLA ผลกระทบของการขาดการเติมน้ำตาลในไกลโคโปรตีนเซลล์ที่แตกต่างกันต่อการทำงานที่หลากหลาย

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
เซลล์กลม
Cell type
ลิมโฟไซต์บี

04Identifiers

Citation
บี-แอลซีแอล-ซีดีจี7 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302018)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CD15 (Lewis x)(+), CD15s (sialylated Lewis x)-, CD75s (sialylated lactosaminyl Noligosccharides)+,CD173 (หมู่เลือด H)-, CD174 (หมู่เลือด Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (ไซอาลิเลต Tn)-, CD176 (TF)+
Antigen expression
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC Class.I+, MHC Class II (HLA-DR)+
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
Subculturing
รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนสื่อกลางเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 2 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 1 x 105 ถึง 5 x 105 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมที่สุด
Fluid renewal
เมื่อสีกลางเปลี่ยนเป็นสีเหลือง
Post-thaw recovery
ระดับกลาง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
เด็ก
Ethnicity
คอเคเชียน