Skip to content
Cellules A704
Tissue
Rein
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
A.704, A-704

Documents

Cellules A704

Cell line · Product number 300217

A-704 is a human epithelial cell line derived from kidney tissue of a 78-year-old male patient with adenocarcinoma. This cell line exhibits an epithelial ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire A-704 est une lignée de cellules épithéliales humaines dérivée du tissu rénal d’un patient de sexe masculin âgé de 78 ans atteint d’un adénocarcinome. Cette lignée cellulaire présente une morphologie épithéliale. Elle constitue une ressource précieuse pour la recherche sur le cancer, en particulier pour l’étude de l’adénocarcinome. La lignée A-704 est polyvalente et trouve des applications dans la culture cellulaire en 3D ainsi que comme hôte de transfection.

Isolée par D.J. Giard, la lignée A-704 conserve sa cohérence et sa fiabilité dans les contextes expérimentaux. L’analyse du caryotype révèle que les cellules A-704 présentent des anomalies telles que des cassures, des dicentriques et des endoréduplications, allant du diploïde à l’hyperdiploïde, en passant par l’hypertriploïde et l’hypertétraploïde.

Bien qu’elles ne soient pas tumorigènes chez les souris immunodéprimées, les cellules A-704 peuvent former des colonies dans un milieu semi-solide. Les cellules A-704 présentent des profils d’isoenzymes spécifiques, notamment AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 et PGM3.

Tissue
Rein
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
  • A.704
  • A-704

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Non
Karyotype
(P59) diploïde à hyperdiploïde, hypertriploïde à hypertétraploïde, présentant des anomalies telles que des cassures, des dicentriques et des endoréduplications

04Identifiers

Citation
A704 (numéro de catalogue Cytion 300217)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1065

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
Une densité de 1 × 10⁴ cellules/cm² permettra d'obtenir une monocouche confluente en 4 jours.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
78 ans
Ethnicity
caucasien