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A704 셀
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A.704, A-704

A704 셀

Cell line · 제품 번호 300217

A-704는 선암을 앓고 있는 78세 남성 환자의 신장 조직에서 유래한 인간 상피 세포주입니다. 이 세포주는 상피성 ...

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01일반 정보

설명

A-704는 선암종에 걸린 78세 남성 환자의 신장 조직에서 추출한 인간 상피 세포주입니다. 이 세포주는 상피 형태를 나타냅니다. 암 연구, 특히 선암 연구에 귀중한 자원입니다. A-704는 3D 세포 배양 및 감염 숙주로서 응용할 수 있는 다목적 세포주입니다.

D.J. Giard에 의해 파생된 A-704는 실험 환경에서 일관성과 신뢰성을 유지합니다. 핵형 분석 결과, A-704 세포는 이배체에서 배수체, 3배체에서 4배체, 4배체에서 5배체까지 단절, 이분열, 내배엽 복제 등의 이상 증상을 보이는 것으로 밝혀졌습니다.

면역억제 마우스에서 종양 유발성은 없지만, A-704 세포는 반고체 배지에서 콜로니를 형성할 수 있습니다. A-704 세포는 AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 및 PGM3를 포함한 특정 동종 효소 프로파일을 나타냅니다.

티슈
신장
질병
선암종
동의어
  • A.704
  • A-704

02분류

생물체
인간
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
아니요
염색체형
(P59) 이배체에서 배수체로, 배수체에서 초이배체로, 단절, 이배체, 내배체 등의 이상이 있는 경우

04식별자

인용
A704(사이티온 카탈로그 번호 300217)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_1065

05발현 및 감수성

이소효소
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²는 4일 이내에 융합 단일층을 형성합니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
78년
민족
백인