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Células A704
Tissue
Rim
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
A.704, A-704

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Células A704

Cell line · Product number 300217

A-704 is a human epithelial cell line derived from kidney tissue of a 78-year-old male patient with adenocarcinoma. This cell line exhibits an epithelial ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A-704 é uma linhagem celular epitelial humana derivada do tecido renal de um paciente do sexo masculino de 78 anos com adenocarcinoma. Essa linhagem celular apresenta morfologia epitelial. É um recurso valioso na pesquisa sobre o câncer, particularmente para o estudo do adenocarcinoma. A A-704 é uma linhagem celular versátil, com aplicações em cultura celular 3D e como hospedeira para transfecção.

Derivada por D.J. Giard, a A-704 mantém consistência e confiabilidade em ambientes experimentais. A análise do cariótipo revela que as células A-704 apresentam anomalias, como quebras, dicêntricos e endoreduplicação, variando de diploides a hiperdiploides, de hipertriploides a hipertetraploides.

Embora não sejam tumorigênicas em camundongos imunossuprimidos, as células A-704 podem formar colônias em um meio semissólido. As células A-704 apresentam perfis específicos de isoenzimas, incluindo AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 e PGM3.

Tissue
Rim
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
  • A.704
  • A-704

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Não
Karyotype
(P59) de diploide a hiperdiploide, de hipertriploide a hypertetraploide, com anomalias que incluem quebras, dicêntricos e endoreduplicação

04Identifiers

Citation
A704 (número de catálogo da Cytion 300217)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1065

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm² resultará em uma monocamada confluente em 4 dias.
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
78 anos
Ethnicity
caucasiano