Skip to content
A704 เซลล์
Tissue
ไต
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
A.704, A-704

Documents

A704 เซลล์

Cell line · Product number 300217

A-704 is a human epithelial cell line derived from kidney tissue of a 78-year-old male patient with adenocarcinoma. This cell line exhibits an epithelial ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A-704 เป็นสายพันธุ์เซลล์เยื่อบุผิวของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้อเยื่อไตของผู้ป่วยชายอายุ 78 ปีที่เป็นมะเร็งต่อมน้ำเหลือง สายพันธุ์เซลล์นี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว เป็นทรัพยากรที่มีค่าในการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งต่อมน้ำเหลือง A-704 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีความหลากหลายในการใช้งาน สามารถนำไปใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 3 มิติ และเป็นโฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน

อนุพันธ์โดย D.J. Giard, A-704 มีความสม่ำเสมอและความน่าเชื่อถือในการทดลอง การวิเคราะห์โครโมโซมแสดงให้เห็นว่าเซลล์ A-704 มีความผิดปกติ เช่น การแตกหัก, การมีโครโมโซมสองเส้น, และการเพิ่มจำนวนภายในเซลล์, ตั้งแต่ระดับไดพลอยด์ไปจนถึงไฮเปอร์ไดพลอยด์, ไฮเปอร์ไตรพลอยด์ไปจนถึงไฮเปอร์เตตระพลอยด์

แม้ว่าเซลล์ A-704 จะไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกัน แต่สามารถสร้างโคโลนีในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็งได้ เซลล์ A-704 แสดงโปรไฟล์ไอโซเอนไซม์เฉพาะ รวมถึง AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 และ PGM3

Tissue
ไต
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • A.704
  • A-704

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่
Karyotype
(P59) ไดพลอยด์ถึงไฮเปอร์ไดพลอยด์, ไฮเปอร์ไตรพลอยด์ถึงไฮเปอร์เตตราพลอยด์พร้อมความผิดปกติรวมถึงการแตกหัก, ไดเซนทริกส์ และการทำซ้ำภายในตัวเอง

04Identifiers

Citation
A704 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300217)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1065

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
78 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน