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A704 Células
Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
A.704, A-704

Documentos

A704 Células

Cell line · Número de producto 300217

La A-704 es una línea celular epitelial humana derivada del tejido renal de un paciente varón de 78 años con adenocarcinoma. Esta línea celular presenta un epitelio...

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Personalización / Recomendaciones

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Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción

A-704 es una línea celular epitelial humana derivada de tejido renal de un paciente varón de 78 años con adenocarcinoma. Esta línea celular presenta una morfología epitelial. Es un recurso valioso en la investigación del cáncer, especialmente para el estudio del adenocarcinoma. A-704 es una línea celular versátil con aplicaciones en cultivos celulares 3D y como huésped de transfección.

Derivada por D.J. Giard, A-704 mantiene su consistencia y fiabilidad en entornos experimentales. El análisis del cariotipo revela que las células A-704 presentan anomalías como roturas, dicéntricas y endorreduplicación, que van de diploides a hiperdiploides, de hipertriploides a hipertetraploides.

Aunque no son tumorigénicas en ratones inmunodeprimidos, las células A-704 pueden formar colonias en un medio semisólido. Las células A-704 presentan perfiles isoenzimáticos específicos, como AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1 y PGM3.

Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • A.704
  • A-704

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
No
Cariotipo
(P59) diploide a hiperdiploide, hipertriploide a hipertetraploide con anomalías que incluyen rupturas, dicéntricos y endorreduplicación

04Identificadores

Referencia
A704 (número de catálogo 300217 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1065

05Expresión y susceptibilidad

Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 dará lugar a una monocapa confluente en 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
78 años
Origen étnico
Caucásico