LS513

La lignée cellulaire LS513 est un modèle de carcinome colorectal bien caractérisé, dérivé d’une biopsie d’une tumeur primaire prélevée en 1985 chez un patient de sexe masculin, de type caucasien, âgé de 63 ans. La tumeur a été classée comme un carcinome cæcal sécrétant de la mucine de stade C selon la classification de Dukes, situé au niveau de la valve de Bauhin. Les cellules LS513 sont de nature adhérente et ont démontré une résistance à plusieurs médicaments (MDR), ce qui en fait un modèle précieux pour l’étude des mécanismes de résistance aux médicaments dans le cancer colorectal. Ces cellules présentent une efficacité de formation de colonies de 30 % dans la méthylcellulose et sont tumorigènes chez la souris nue, ce qui confirme davantage leur utilité dans les études oncogéniques.

Sur le plan génétique, les cellules LS513 présentent plusieurs caractéristiques notables. Elles sont positives pour l’oncogène p53 de type sauvage et expriment l’antigène carcino-embryonnaire (ACE) sur environ 50 % des cellules. De plus, les cellules LS513 expriment des antigènes du complexe majeur d’histocompatibilité (CMH) de classe I, notamment les antigènes HLA et la bêta-2-microglobuline, mais ne possèdent pas d’antigènes du CMH de classe II (HLA-DR, DQ et DP). Ces cellules produisent également le facteur de croissance transformant bêta 1 (TGF-bêta-1) à un taux de 83 pg par 10^⁶ cellules par 24 heures. Il est à noter que le TGF-bêta-1 agit comme un inhibiteur de la prolifération des cellules LS513, tandis que le TGF-bêta-2 n’a pas d’effet significatif sur leur croissance. Par rapport à la lignée cellulaire LS1034, les cellules LS513 sont 100 fois moins sensibles au TGF-bêta-1, ce qui indique des réponses distinctes à la signalisation des facteurs de croissance entre ces deux modèles de carcinome colorectal.

Les cellules LS513 présentent un profil d’expression antigénique unique, caractérisé par une forte positivité pour la molécule d’adhésion intercellulaire 1 (ICAM-1) et les antigènes HLA de classe I. L’absence d’expression des antigènes du CMH de classe II est particulièrement remarquable, car elle suggère l’existence de mécanismes potentiels d’évasion immunitaire qui pourraient jouer un rôle dans la progression et les métastases du cancer colorectal. Ces caractéristiques, combinées à leur résistance à de multiples médicaments et à leur capacité à former des tumeurs chez des souris immunodéprimées, font des cellules LS513 un outil puissant pour l’étude des fondements moléculaires et cellulaires du cancer colorectal, en particulier dans le contexte des interactions immunitaires et de la résistance thérapeutique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.