LS513
Cell line · Product number 300457
The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...
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01General information
- Description
LS513细胞系是一种表征完善的结直肠癌模型，源自1985年对一名63岁白人男性患者原发肿瘤活检样本。该肿瘤被归类为杜氏分期C期黏液分泌型盲肠癌，位于鲍氏瓣处。 LS513细胞具有粘附特性，并表现出多药耐药性（MDR），使其成为研究结直肠癌耐药机制的宝贵模型。该细胞在甲基纤维素中的集落形成效率达30%，且能在裸鼠体内形成肿瘤，进一步验证了其在致癌研究中的应用价值。
在遗传学层面，LS513细胞具有若干显著特征：其表达野生型p53致癌基因，约50%细胞表面表达癌胚抗原（CEA）。 此外，LS513细胞表达主要组织相容性复合体（MHC）I类抗原（包括HLA和β2微球蛋白），但缺乏MHC II类抗原（HLA-DR、DQ和DP）。该细胞每10⁶个细胞每24小时可产生83皮克转化生长因子β1（TGF-β1）。 值得注意的是，TGF-β1可抑制LS513细胞增殖，而TGF-β2对其生长无显著影响。与LS1034细胞系相比，LS513细胞对TGF-β1的敏感性降低100倍，表明这两种结直肠癌模型对生长因子信号的反应存在显著差异。
LS513细胞展现出独特的抗原表达谱，对细胞间粘附分子1（ICAM-1）和HLA I类抗原呈强阳性反应。 值得特别关注的是其缺乏MHCⅡ类抗原表达，这暗示了可能与结直肠癌进展及转移相关的免疫逃逸机制。这些特征结合其多重耐药性及在免疫缺陷小鼠中形成肿瘤的能力，使LS513细胞成为研究结直肠癌分子与细胞机制的强大工具，尤其在免疫相互作用和治疗耐药性领域具有重要价值。
- Tissue
- 结肠直肠癌
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- LS513
- LS 513
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是，在裸鼠体内形成肿瘤
- Karyotype
- 可以区分出两个干系。主干系有 65% 的细胞，模式数为 51xY，有 3 个标记：M1-der(1)t(1,15)、M2-der(2)t(2,3)der(3)t(2,3)、M3 和单体 15。第二个干系的染色体模数为 52xY，出现了 M2 和 M3 以及 1 号染色体长臂的同源染色体 M4。在分析的所有细胞中都出现了 5、7 三体、13 四体、2 和 3 单体，该品系没有出现 15 单体。
04Identifiers
- Citation
- LS513（Cytion 目录号 300457）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1386
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- CEA+（50%），p53+
- Antigen expression
- 癌胚抗原 (CEA)、ICAM-1、HLA I 类阳性
- Products
- 转化生长因子 beta-1（TGF beta-1，每 10 个 exp6 细胞 83 皮克/24 小时）
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每 3 天
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 63 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes