LS513

A linhagem celular LS513 é um modelo bem caracterizado de carcinoma colorretal, derivado de uma biópsia de tumor primário realizada em 1985 em um paciente do sexo masculino, de etnia caucasiana, com 63 anos de idade. O tumor foi classificado como um carcinoma cecal secretor de mucina, de estágio C de Dukes, localizado na válvula de Bauhin. As células LS513 são de natureza aderente e demonstraram resistência a múltiplas drogas (MDR), o que as torna um modelo valioso para o estudo dos mecanismos de resistência a medicamentos no câncer colorretal. Essas células apresentam uma eficiência de formação de colônias de 30% em metilcelulose e são tumorigênicas em camundongos nude, o que valida ainda mais seu uso em estudos oncogênicos.

No nível genético, as células LS513 apresentam várias características notáveis. Elas são positivas para o oncogene p53 do tipo selvagem e expressam o antígeno carcinoembrionário (CEA) em aproximadamente 50% das células. Além disso, as células LS513 expressam antígenos do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I, incluindo HLA e beta-2-microglobulina, mas não apresentam antígenos do MHC de classe II (HLA-DR, DQ e DP). As células também produzem o fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-beta-1) a uma taxa de 83 pg por 10^⁶ células a cada 24 horas. Notavelmente, o TGF-beta-1 atua como um inibidor da proliferação das células LS513, enquanto o TGF-beta-2 não tem efeito significativo sobre o crescimento delas. Em comparação com a linhagem celular LS1034, as células LS513 são 100 vezes menos sensíveis ao TGF-beta-1, indicando respostas distintas à sinalização de fatores de crescimento entre esses dois modelos de carcinoma colorretal.

As células LS513 apresentam um perfil único de expressão de antígenos, com forte positividade para a molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) e antígenos HLA de classe I. A ausência de expressão de antígenos MHC de classe II é particularmente digna de nota, pois sugere possíveis mecanismos de evasão imunológica que poderiam ser relevantes para a progressão e metástase do câncer colorretal. Essas características, juntamente com sua resistência a múltiplos medicamentos e sua capacidade de formar tumores em camundongos imunocomprometidos, tornam as células LS513 uma ferramenta poderosa para o estudo dos fundamentos moleculares e celulares do câncer colorretal, especialmente no contexto das interações imunológicas e da resistência terapêutica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.