LS513
Cell line · Product number 300457
The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...
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01General information
- Description
LS513 細胞系是一種特徵明確的結直腸癌模型，源自 1985 年從一名 63 歲白人男性患者身上切取的原發性腫瘤活檢樣本。該腫瘤被歸類為位於鮑欣瓣處的杜克斯 C 期黏液分泌性盲腸癌。 LS513 細胞本質上為黏附型細胞，且已證實具有多重藥物抗性（MDR），使其成為研究結直腸癌藥物抗性機制的重要模型。這些細胞在甲基纖維素中的集落形成效率為 30%，並能在裸鼠體內形成腫瘤，進一步驗證了其在致癌機制研究中的應用價值。
在遺傳層面上，LS513 細胞表現出若干顯著特徵。它們對 p53 野生型致癌基因呈陽性反應，且約 50% 的細胞表達癌胚抗原（CEA）。 此外，LS513 細胞表達主要組織相容性複合體（MHC）I 類抗原，包括 HLA 和 β2 微球蛋白，但不表達 MHC II 類抗原（HLA-DR、DQ 和 DP）。 該細胞每 24 小時每 10⁶ 個細胞可產生 83 pg 的轉化生長因子 β1（TGF-β1）。值得注意的是，TGF-β1 會抑制 LS513 細胞的增殖，而 TGF-β2 則對其生長無顯著影響。 與 LS1034 細胞系相比，LS513 細胞對 TGF-β-1 的敏感性低 100 倍，這表明這兩種結直腸癌模型對生長因子訊號傳導的反應存在顯著差異。
LS513 細胞展現出獨特的抗原表達特徵，對細胞間黏附分子 1（ICAM-1）及 HLA I 類抗原呈現強烈的陽性反應。其中，缺乏 MHC II 類抗原的表達尤為值得注意，這暗示了可能與大腸直腸癌進展及轉移相關的潛在免疫逃逸機制。 這些特徵，加上其對多種藥物的耐藥性，以及在免疫缺陷小鼠體內形成腫瘤的能力，使 LS513 細胞成為研究大腸直腸癌分子與細胞基礎的強大工具，特別是在免疫相互作用與治療耐藥性的背景下。
- Tissue
- 大腸直腸
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- LS513
- LS 513
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，會在裸鼠體內形成腫瘤
- Karyotype
- 可區分為兩條胚系。其中主要的一條見於 65% 的細胞中，其模數為 51,xY，並具有 3 個標記：M1 - der(1)t(1,15)， M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3)、M3，以及第15號染色體單體症。 第二條母系譜系的模態染色體數為 52,xY，呈現 M2 和 M3，外加一個稱為 M4 的第 1 號染色體長臂等臂染色體。 在所有經分析的細胞中，均存在第5、7號染色體三體、第13號染色體四體，以及第2號與第3號染色體單體；該系未呈現第15號染色體單體。
04Identifiers
- Citation
- LS513（Cytion 型號 300457）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1386
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- CEA+（50%），p53+
- Antigen expression
- 癌胚抗原（CEA）、ICAM-1、HLA I類呈陽性
- Products
- 轉化生長因子β-1（TGF-β-1，每 10 exp6 個細胞每 24 小時 83 pg）
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM：Ham's F12（1:1），重量比：3.1 g/L 葡萄糖，重量比：2.5 mM L-谷氨酰胺，重量比：15 mM HEPES， w: 0.5 mM 丙酮酸鈉，w: 1.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820400a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每 3 天
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 63年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes