Skip to content
LS513
Tissue
Đại tràng và trực tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
LS513, LS 513

Documents

LS513

Cell line · Product number 300457

The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...

€650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào LS513 là một mô hình ung thư đại trực tràng được đặc trưng rõ ràng, được phân lập từ mẫu sinh thiết khối u nguyên phát lấy từ một bệnh nhân nam da trắng 63 tuổi vào năm 1985. Khối u được phân loại là ung thư đại tràng tiết nhầy loại C theo phân loại Dukes, nằm tại van Bauhin. Tế bào LS513 có tính chất bám dính và đã thể hiện khả năng kháng đa thuốc (MDR), khiến chúng trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu cơ chế kháng thuốc trong ung thư đại trực tràng. Các tế bào này có hiệu suất tạo khối u 30% trong methylcellulose và có khả năng gây ung thư ở chuột nude, càng khẳng định tính ứng dụng của chúng trong các nghiên cứu ung thư.

Ở mức độ di truyền, tế bào LS513 biểu hiện một số đặc điểm đáng chú ý. Chúng dương tính với gen ung thư p53 kiểu hoang dã và biểu hiện kháng nguyên ung thư phôi (CEA) trên khoảng 50% tế bào. Ngoài ra, các tế bào LS513 biểu hiện các kháng nguyên phức hợp tương thích mô chính (MHC) loại I, bao gồm HLA và beta 2 microglobulin, nhưng thiếu các kháng nguyên MHC loại II (HLA-DR, DQ và DP). Các tế bào này cũng sản xuất yếu tố tăng trưởng biến đổi beta 1 (TGF beta-1) với tốc độ 83 pg trên 10⁶ tế bào trong 24 giờ. Đáng chú ý, TGF beta-1 hoạt động như một chất ức chế sự phát triển của tế bào LS513, trong khi TGF beta-2 không có tác động đáng kể đến sự phát triển của chúng. So với dòng tế bào LS1034, tế bào LS513 ít nhạy cảm hơn 100 lần với TGF beta-1, cho thấy sự khác biệt trong phản ứng với tín hiệu yếu tố tăng trưởng giữa hai mô hình ung thư đại trực tràng này.

Tế bào LS513 có một hồ sơ biểu hiện kháng nguyên độc đáo, với độ dương tính mạnh đối với phân tử kết dính tế bào giữa (ICAM-1) và kháng nguyên HLA loại I. Sự thiếu hụt biểu hiện kháng nguyên MHC loại II đặc biệt đáng chú ý, vì nó gợi ý các cơ chế tránh miễn dịch tiềm ẩn có thể liên quan đến sự tiến triển và di căn của ung thư đại trực tràng. Các đặc điểm này, cùng với khả năng kháng nhiều loại thuốc và khả năng hình thành khối u ở chuột suy giảm miễn dịch, khiến các tế bào LS513 trở thành công cụ mạnh mẽ để nghiên cứu các cơ chế phân tử và tế bào cơ bản của ung thư đại trực tràng, đặc biệt trong bối cảnh tương tác miễn dịch và kháng trị liệu.

Tissue
Đại tràng và trực tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
  • LS513
  • LS 513

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng, gây u ở chuột nude
Karyotype
Có thể phân biệt hai dòng tế bào gốc. Dòng chính xuất hiện trong 65% tế bào, với số nhiễm sắc thể trung bình là 51,xY và 3 dấu hiệu: M1 - der(1)t(1,15), M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3), M3, và một trường hợp monosomy 15. Dòng tế bào gốc thứ hai có số lượng nhiễm sắc thể trung bình là 52,xY và có M2 và M3 cùng với một isochromosome cho cánh dài của nhiễm sắc thể 1 được gọi là M4. Trisomy 5,7, tetrasomy 13 và monosomy 2 và 3 có mặt trong tất cả các tế bào được phân tích, dòng tế bào này không có monosomy 15.

04Identifiers

Citation
LS513 (Số catalog Cytion 300457)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1386

05Expression and susceptibility

Protein expression
CEA dương tính (50%), p53 dương tính
Antigen expression
Kháng nguyên ung thư phôi (CEA), ICAM-1, HLA loại I dương tính
Products
Yếu tố tăng trưởng biến đổi beta 1 (TGF beta-1, 83 pg trên 10⁶ tế bào trong 24 giờ)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 3 ngày
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
63 năm
Ethnicity
Người da trắng