Skip to content
LS513
Tissue
קולורקטלי
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
LS513, LS 513

Documents

LS513

Cell line · Product number 300457

The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים LS513 הוא מודל מאופיין היטב של קרצינומה של המעי הגס, שמקורו בביופסיה של גידול ראשוני שנלקחה בשנת 1985 מחולה גבר לבן בן 63. הגידול סווג כקרצינומה של המעי העיוור המפרישה מוקוזין מסוג Dukes C, הממוקמת בשסתום Bauhin. תאי LS513 הם בעלי אופי הדבקתי והוכיחו עמידות לתרופות מרובות (MDR), מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר מנגנוני עמידות לתרופות בסרטן המעי הגס. תאים אלה מפגינים יעילות של 30% ביצירת מושבות במתילצלולוזה והם ממאירים בעכברים עירומים, מה שמאשר עוד יותר את השימוש בהם במחקרים אונקוגניים.

ברמה הגנטית, תאי LS513 מבטאים מספר מאפיינים בולטים. הם חיוביים לאונקוגן p53 מסוג wild-type ומבטאים אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) בכ-50% מהתאים. בנוסף, תאי LS513 מבטאים אנטיגנים מסוג MHC (Major Histocompatibility Complex) מסוג I, כולל HLA ו-beta 2 microglobulin, אך חסרים אנטיגנים מסוג MHC מסוג II (HLA-DR, DQ ו-DP). התאים מייצרים גם גורם גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF beta-1) בקצב של 83 pg ל-106 תאים ב-24 שעות. יש לציין כי TGF בטא-1 פועל כמעכב של התרבות תאי LS513, בעוד ש-TGF בטא-2 אינו משפיע באופן משמעותי על צמיחתם. בהשוואה לקו התאים LS1034, תאי LS513 רגישים פי 100 פחות ל-TGF בטא-1, מה שמעיד על תגובות שונות לאיתות גורם הצמיחה בין שני מודלים אלה של קרצינומה של המעי הגס.

תאי LS513 מציגים פרופיל ייחודי של ביטוי אנטיגן, עם חיוביות חזקה למולקולת הדבקה בין-תאית 1 (ICAM-1) ולאנטיגנים מסוג HLA class I. היעדר ביטוי אנטיגן MHC class II ראוי לציון במיוחד, שכן הוא מצביע על מנגנוני התחמקות חיסונית פוטנציאליים העשויים להיות רלוונטיים להתקדמות סרטן המעי הגס ולגרורות. תכונות אלה, יחד עם עמידותם לתרופות מרובות ויכולתם ליצור גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, הופכות את תאי LS513 לכלי רב עוצמה לחקר הבסיס המולקולרי והתאי של סרטן המעי הגס, במיוחד בהקשר של אינטראקציות חיסוניות ועמידות טיפולית.

Tissue
קולורקטלי
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • LS513
  • LS 513

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, יוצר גידולים בעכברים עירומים
Karyotype
ניתן להבחין בשני קווי גזע. הקו העיקרי היה מיוצג ב-65% מהתאים, עם מספר מודאלי של 51,xY ו-3 סמנים, M1 - der(1)t(1,15), M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3), M3, ומונוזומיה 15. הקו השני של תאי גזע היה בעל מספר כרומוזומים מודאלי של 52,xY והציג M2 ו-M3 בתוספת איזוכרומוזום לזרוע הארוכה של כרומוזום 1 המכונה M4. טריזומיה 5,7, טטרזומיה 13 ומונוזומיה 2 ו-3 היו נוכחים בכל התאים שנבדקו, הקו לא הציג מונוזומיה 15.

04Identifiers

Citation
LS513 (מספר קטלוגי Cytion 300457)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1386

05Expression and susceptibility

Protein expression
CEA+ (50%), p53+
Antigen expression
אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), ICAM-1, HLA סוג I חיובי
Products
פקטור גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF בטא-1, 83 pg לכל 10 exp6 תאים ב-24 שעות)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 ימים
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
63 שנים
Ethnicity
קווקזי