Skip to content
C2C12
Tissue
שריר
Synonyms
C2c12, C2-C12, C12

Documents

C2C12

Cell line · Product number 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים C2C12, קו תאים מיובלסטיים של עכבר שהונצחו, שמקורם בשריר הירך של עכבר בן חודשיים מזן C3H, נמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי בשל תכונות ההבחנה התאית הייחודיות שלו. תאי מיובלסט C2C12 מתרבים במהירות ומפגינים מאפיינים טיפוסיים של מיובלסט בתנאים של רמות סרום גבוהות. עם המעבר לתנאים של רמות סרום נמוכות או רעב, תאי C2C12 מתחילים בהבחנה מיוגנית, ועוברים שינוי למיוטובים, שהם מבשרי תאי שריר שלד מתכווצים.

תאי C2C12 משלבים בקלות cDNA וחומצות גרעין אקסוגניות באמצעות טרנספקציה, מה שהופך אותם לבחירה טובה למחקרים על ביטוי גנים ולחקירות על התמיינות מיובלסטים ומיוטובים. תהליך ההבחנה מתאפיין בביטוי של סמנים מיוגניים כגון Myf5, MyoD, Myogenin ו-Mrf4, לצד סמנים ספציפיים לשרירים כגון Csrp3 ו-Mef2a, החיוניים לחקר פנוטיפים שונים של שרירים והתחדשות שרירי השלד.

הצורה הייחודית של מיובלסטים C2C12 והפיכתם לטבעות תאים מיובלסטיות ובהמשך למיוטובים בוגרים בתווך מועשר בסרום מדגישים את האופי הדינמי של תאים אלה ואת הפוטנציאל שלהם במחקר שרירי השלד.

חוקרים משתמשים במצעים כגון ג'לטין הידרוג'ל לתרבויות תאים C2C12 כדי לדמות תנאי שריר in vivo, מה שמאפשר מחקרים מפורטים על התפתחות תאי שריר והשפעות המטריצה החוץ-תאית. פרופיל מטבולי חושף תובנות מרכזיות על המסלולים המעורבים ביצירת שרירים ובהתאוששותם, תוך התמקדות בחלבונים חיוניים ובתפקידו של הסידן בהתכווצות. טכניקות השתקת גנים מאירות עוד יותר את תהליך ההבחנה, ומדגישות את חשיבותה של זרחון SMAD1 בהתחדשות השרירים, החיונית להבנת ההתאוששות מבזבוז שרירים ופציעות.

לסיכום, קו התאים C2C12 משמש ככלי חיוני בתחום המחקר הביו-רפואי, ומציע פלטפורמה רב-תכליתית לחקר המורכבות של היווצרות השרירים, הבחנה, ביטוי גנים וההשפעה העמוקה של גורמים שונים על שושלת תאי השרירים השלדיים, כולל התפקיד המרכזי של מיופילמנטים, חלבוני פילמנטים ביניים וההקשר האורגניזמי הכולל שבו מתרחשים תהליכים תאיים אלה.

Tissue
שריר
Applications
מארח טרנספקציה
Synonyms
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי מיובלסט
Cell type
מיובלסט
Doubling time
24 שעות

04Identifiers

Citation
C2C12 (מספר קטלוגי Cytion 400476)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0188

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-4 ימים.
Fluid renewal
כל 3 עד 5 ימים
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
C3H
Donor age
חודשיים