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C2C12
Tissue
肌肉
Synonyms
C2c12, C2-C12, C12

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C2C12

Cell line · Product number 400476

The C2C12 cell line, an immortalized mouse myoblast cell line derived from the thigh muscle of a 2-month-old mouse of the C3H mouse strain, is extensively...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

C2C12 細胞系是一種源自 C3H 小鼠品系、2 個月大小鼠大腿肌肉的不朽化小鼠肌母細胞系,因其獨特的細胞分化特性,在生物醫學研究中被廣泛應用。 C2C12肌母細胞在高血清條件下會快速增殖,並展現典型的肌母細胞特徵。當轉移至低血清條件或飢餓狀態時,C2C12細胞會啟動肌源性分化,轉變為肌管,而肌管正是具有收縮能力的骨骼肌細胞的前體。

C2C12 細胞能透過轉染輕鬆整合外源性 cDNA 和核酸,使其成為基因表達研究以及肌母細胞與肌管分化研究的好選擇。 此分化過程的特徵在於會表達肌源性標記物(如 Myf5、MyoD、Myogenin 和 Mrf4),以及肌肉特異性標記物(如 Csrp3 和 Mef2a),這些標記物對於研究不同的肌肉表型及骨骼肌再生至關重要。

C2C12肌母細胞獨特的形狀,以及它們在添加血清的培養基中轉化為肌母細胞環,進而發展為成熟肌管的過程,凸顯了這些細胞的動態特性及其在骨骼肌研究中的潛力。

研究人員利用明膠水凝膠等基質進行 C2C12 細胞培養,以模擬體內肌肉環境,從而能詳細研究肌肉細胞的發育及細胞外基質的影響。 代謝分析揭示了參與肌肉形成與恢復的關鍵路徑,重點在於必需蛋白質以及鈣離子在肌肉收縮中的作用。基因沉默技術進一步闡明了分化過程,突顯了 SMAD1 磷酸化在肌肉再生中的重要性,這對於理解肌肉萎縮與損傷後的恢復至關重要。

總而言之,C2C12 細胞系是生物醫學研究領域中的一項關鍵工具,為探索肌肉形成、分化、 基因表達,以及各種因素對骨骼肌細胞譜系的深遠影響,包括肌絲、中間絲蛋白所扮演的關鍵角色,以及這些細胞過程所處的整體生物體背景。

Tissue
肌肉
Applications
轉染宿主
Synonyms
  • C2c12
  • C2-C12
  • C12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
類肌母細胞
Cell type
肌母細胞
Doubling time
24小時

04Identifiers

Citation
C2C12(Cytion 型號 400476)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0188

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm² 約需 4 天即可形成密合的細胞層
Fluid renewal
每 3 至 5 天
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Breed / subspecies
C3H
Donor age
2個月