C2C12

เซลล์ไลน์ C2C12 ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์ไมโอบลาสต์ของหนูที่ถูกทำให้เป็นอมตะที่ได้มาจากกล้ามเนื้อต้นขาของหนูอายุ 2 เดือน สายพันธุ์ C3H ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยทางชีวการแพทย์เนื่องจากคุณสมบัติการแยกตัวเป็นเซลล์เฉพาะทางที่เป็นเอกลักษณ์เซลล์ไมโอบลาสต์ C2C12 แพร่กระจายอย่างรวดเร็วและมีลักษณะเฉพาะของไมโอบลาสต์ภายใต้สภาวะซีรัมสูง เมื่อเปลี่ยนไปอยู่ในสภาวะซีรัมต่ำหรืออดอาหาร เซลล์ C2C12 จะเริ่มกระบวนการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์กล้ามเนื้อ (myogenic differentiation) โดยเปลี่ยนเป็นไมโอทูบ ซึ่งเป็นตัวตั้งต้นของเซลล์กล้ามเนื้อลายที่สามารถหดตัวได้

เซลล์ C2C12 สามารถรับ cDNA และกรดนิวคลีอิกจากภายนอกได้โดยการทรานส์เฟคชันอย่างง่ายดาย ทำให้เป็นตัวเลือกที่ดีสำหรับการศึกษาการแสดงออกของยีนและการวิจัยเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์กล้ามเนื้อและท่อกล้ามเนื้อกระบวนการแยกแยะนี้ถูกกำหนดโดยการแสดงออกของตัวบ่งชี้การสร้างกล้ามเนื้อ เช่น Myf5, MyoD, Myogenin และ Mrf4 ร่วมกับตัวบ่งชี้เฉพาะของกล้ามเนื้อ เช่น Csrp3 และ Mef2a ซึ่งมีความสำคัญในการศึกษาลักษณะทางฟีโนไทป์ของกล้ามเนื้อที่แตกต่างกันและการสร้างกล้ามเนื้อใหม่

รูปร่างที่เป็นเอกลักษณ์ของเซลล์ไมโอบลาสต์ C2C12 และการเปลี่ยนแปลงเป็นวงแหวนเซลล์ไมโอบลาสต์และต่อมาเป็นไมโอทูบที่สมบูรณ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีซีรั่มเสริม แสดงให้เห็นถึงลักษณะพลวัตของเซลล์เหล่านี้และศักยภาพในการวิจัยเกี่ยวกับกล้ามเนื้อลาย

นักวิจัยใช้สารตั้งต้นเช่นเจลาตินไฮโดรเจลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ C2C12 เพื่อจำลองสภาวะกล้ามเนื้อในร่างกายจริง ทำให้สามารถศึกษาการพัฒนาของเซลล์กล้ามเนื้อและผลกระทบของเมทริกซ์นอกเซลล์ได้อย่างละเอียด การวิเคราะห์โปรไฟล์เมตาบอลิซึมเผยให้เห็นข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับเส้นทางที่เกี่ยวข้องในการสร้างกล้ามเนื้อและการฟื้นตัว โดยเน้นที่โปรตีนที่จำเป็นและบทบาทของแคลเซียมในการหดตัว เทคนิคการปิดเสียงยีนยังช่วยเพิ่มความเข้าใจในกระบวนการเปลี่ยนแปลงเซลล์ โดยเน้นความสำคัญของการฟอสโฟรีเลชันของ SMAD1 ในการสร้างกล้ามเนื้อใหม่ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจการฟื้นตัวในภาวะกล้ามเนื้อลีบและการบาดเจ็บ

โดยสรุปแล้ว สายเซลล์ C2C12 ทำหน้าที่เป็นเครื่องมือสำคัญในวงการวิจัยชีวการแพทย์ โดยเป็นแพลตฟอร์มอเนกประสงค์สำหรับการสำรวจความซับซ้อนของการสร้างกล้ามเนื้อ การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ การแสดงออกของยีน และผลกระทบอันลึกซึ้งของปัจจัยต่างๆ ต่อสายพันธุ์เซลล์กล้ามเนื้อโครงร่าง รวมถึงบทบาทสำคัญของไมโอฟิลามีน โปรตีนฟิลามีนระดับกลาง และบริบทของสิ่งมีชีวิตโดยรวมที่กระบวนการเซลล์เหล่านี้เกิดขึ้น

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.