Skip to content
NIH-3T3
Tissue
ตัวอ่อน
Synonyms
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Documents

NIH-3T3

Cell line · Product number 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ NIH-3T3 เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฟโบรบลาสต์ที่ได้มาจากเนื้อเยื่อของตัวอ่อนหนูสายพันธุ์ NIH Swiss เซลล์เหล่านี้มีลักษณะเด่นคือรูปร่างคล้ายแกนหมุน และได้รับความนิยมอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางวิทยาศาสตร์ เนื่องจากสามารถเจริญเติบโตได้อย่างรวดเร็วและมีความหนาแน่นของเซลล์สูงเซลล์ NIH-3T3 เป็นที่รู้จักเป็นพิเศษในด้านประโยชน์ในการศึกษาทางพันธุกรรม รวมถึงการทดลองถ่ายโอนดีเอ็นเอ ซึ่งใช้เพื่อนำดีเอ็นเอจากสิ่งแปลกปลอมเข้าสู่จีโนมของพวกมัน สิ่งนี้ทำให้พวกมันกลายเป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการศึกษาการทำงานและการควบคุมของยีน

นอกจากนี้ เซลล์ NIH-3T3 ยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยด้านมะเร็ง โดยเฉพาะในการทดสอบเพื่อระบุและจำแนกยีนที่ก่อให้เกิดมะเร็ง เซลล์เหล่านี้มีความสามารถโดดเด่นในการสนับสนุนการแพร่กระจายของไวรัสหลากหลายชนิด รวมถึงไวรัสซาร์โคมาและไวรัสลูคีเมีย ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นส่วนสำคัญในการศึกษาด้านไวรัสวิทยา

หนึ่งในคุณสมบัติหลักของเซลล์ไลน์ NIH-3T3 คือการมีชีวิตอมตะโดยธรรมชาติ คุณลักษณะนี้เมื่อรวมกับความเสถียรทางพันธุกรรมตลอดการเพาะเลี้ยงต่อเนื่อง ทำให้เซลล์ NIH-3T3 เป็นระบบต้นแบบที่โดดเด่นสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการของเซลล์ เส้นทางการส่งสัญญาณ และผลกระทบของการรักษาทางเภสัชวิทยาต่างๆ ในเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

เซลล์ NIH 3T3 ของหนูมีลักษณะเด่นคือมีประชากรเซลล์ที่หลากหลาย ซึ่งเน้นย้ำถึงความไม่สม่ำเสมอของเซลล์ในตัวเองภายในกลุ่มย่อยของไฟโบรบลาสต์ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการถอดรหัสปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างองค์ประกอบของเซลล์และโครงสร้างของเนื้อเยื่อ เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะรูปร่างคล้ายแกนบนพื้นผิวไคโตซาน และเปลี่ยนเป็นรูปทรงยาวเมื่ออยู่บนพื้นผิว OCMCS (เซลลูโลสออกซิไดซ์)

ออนโทโลยีของสายเซลล์ NIH3T3 ครอบคลุมถึงซับโคลนต่างๆ รวมถึง 3T3-L1 ซึ่งเป็นแบบจำลองสำหรับการสร้างไขมัน และ 3T3-J2 ที่ใช้เป็นชั้นฟีดเดอร์ในการเพาะเลี้ยงเซลล์เคราติโนไซต์ แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการประยุกต์ใช้ที่หลากหลายของสายเซลล์นี้ในอัตราการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่แตกต่างกันและสาขาวิจัยที่หลากหลาย

เซลล์ NIH-3T3 มีความสำคัญอย่างยิ่งในการวิจัยเนื่องจากมีการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว รูปร่างคล้ายแกนหมุน และความหลากหลายในการศึกษาทางพันธุกรรมและมะเร็งวิทยา การเป็นอมตะโดยธรรมชาติและความเสถียรทางพันธุกรรมของพวกมันช่วยเพิ่มประโยชน์ในการสำรวจพลวัตของเซลล์และผลกระทบทางเภสัชวิทยาความหลากหลายภายในสายเซลล์นี้ รวมถึงการตอบสนองต่อสารตั้งต้นต่างๆ และการมีอยู่ของกลุ่มย่อยเฉพาะทางเช่น 3T3-L1 และ 3T3-J2 เน้นย้ำถึงการใช้งานที่หลากหลายและบทบาทสำคัญในการพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับพฤติกรรมของเซลล์และกลไกของโรค

Tissue
ตัวอ่อน
Applications
โฮสต์สำหรับการถ่ายโอนยีน
Synonyms
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายแกนหมุน ซึ่งบ่งบอกถึงธรรมชาติของเซลล์ไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
NIH-3T3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400101)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Expression and susceptibility

Viruses
MAP-test: ผลลบ.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
สถาบันสุขภาพแห่งชาติสวิตเซอร์แลนด์
Donor age
เอ็มบริโอ