NIH-3T3

As células NIH-3T3 são uma linhagem de fibroblastos derivada do tecido de um embrião de camundongo NIH Swiss. Essas células são conhecidas por sua morfologia fusiforme e são amplamente utilizadas em pesquisas científicas devido à sua capacidade de crescer rapidamente e atingir uma alta densidade celular. As células NIH-3T3 são particularmente conhecidas por sua utilidade em estudos genéticos, incluindo experimentos de transfecção de DNA, nos quais são utilizadas para introduzir DNA estranho em seus genomas. Isso as tornou uma ferramenta valiosa para o estudo da função e regulação gênica.

Além disso, as células NIH-3T3 são empregadas em pesquisas oncológicas, especificamente em ensaios para a identificação e caracterização de genes causadores de câncer. Elas possuem uma notável capacidade de sustentar a propagação de vários tipos de vírus, incluindo vírus de sarcoma e leucemia, tornando-as essenciais para estudos virológicos.

Uma das principais características da linhagem celular NIH-3T3 é sua imortalização espontânea. Essa característica, combinada com sua estabilidade genética ao longo de passagens contínuas, torna as células NIH-3T3 um sistema modelo exemplar para a exploração de processos celulares, vias de sinalização e os efeitos de vários tratamentos farmacológicos em células de mamíferos.

Caracterizadas por uma população celular heterogênea, as células de camundongo NIH-3T3 destacam a heterogeneidade celular intrínseca entre os subtipos de fibroblastos, o que é fundamental para decifrar a complexa interação entre a composição celular e a arquitetura tecidual. Essas células exibem uma morfologia semelhante a um fuso em uma superfície de quitosana, passando para uma forma alongada em superfícies de OCMCS (celulose oxidada).

A ontologia da linhagem celular NIH-3T3 abrange vários subclones, incluindo o 3T3-L1, um modelo para adipogênese, e o 3T3-J2, empregado como camada alimentadora em culturas de queratinócitos, ilustrando a ampla aplicabilidade da linhagem celular em diferentes taxas de proliferação e disciplinas de pesquisa.

As células NIH-3T3 são fundamentais na pesquisa devido ao seu rápido crescimento, morfologia em forma de fuso e versatilidade em estudos genéticos e oncogênicos. Sua imortalização espontânea e estabilidade genética aumentam sua utilidade na exploração da dinâmica celular e dos efeitos farmacológicos. A diversidade dentro dessa linhagem celular, incluindo sua resposta a vários substratos e a existência de subclones especializados como o 3T3-L1 e o 3T3-J2, ressalta sua ampla aplicabilidade e seu papel fundamental no avanço de nossa compreensão do comportamento celular e dos mecanismos das doenças.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.