Přejít na obsah
NIH-3T3
Tkáň
Embryonální
Synonyma
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenty

NIH-3T3

Cell line · Číslo výrobku 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky NIH-3T3 jsou fibroblastovou buněčnou linií odvozenou z tkáně myšího embrya NIH Swiss. Tyto buňky jsou známé svou vřetenovitou morfologií a jsou hojně využívány ve vědeckém výzkumu díky své schopnosti rychlého růstu a vysoké hustotě buněk. Buňky NIH-3T3 jsou zvláště známé pro svou užitečnost v genetických studiích, včetně pokusů s transfekcí DNA, kdy se používají k zavádění cizí DNA do genomu. Díky tomu se staly cenným nástrojem pro studium funkce a regulace genů.

Kromě toho se buňky NIH-3T3 používají v onkogenním výzkumu, konkrétně v testech pro identifikaci a charakterizaci genů způsobujících rakovinu. Mají pozoruhodnou schopnost podporovat množení různých typů virů, včetně sarkomových a leukemických virů, což z nich činí nedílnou součást virologických studií.

Jednou z klíčových vlastností buněčné linie NIH-3T3 je její spontánní imortalizace. Tato vlastnost spolu s jejich genetickou stabilitou při kontinuálním pasážování činí z buněk NIH-3T3 příkladný modelový systém pro zkoumání buněčných procesů, signálních drah a účinků různých farmakologických léčebných postupů v savčích buňkách.

Myší buňky NIH 3T3 se vyznačují heterogenní buněčnou populací a podtrhují vnitřní buněčnou heterogenitu v rámci subtypů fibroblastů, která je rozhodující pro rozluštění složité souhry mezi buněčným složením a tkáňovou architekturou. Tyto buňky vykazují vřetenovitou morfologii na chitosanovém povrchu, která přechází do protáhlé formy na povrchu OCMCS (oxidovaná celulóza).

Ontologie buněčné linie NIH3T3 zahrnuje různé subklony, včetně 3T3-L1, modelu pro adipogenezi, a 3T3-J2, používaného jako napájecí vrstva v keratinocytárních kulturách, což ilustruje širokou použitelnost buněčné linie v různých mírách proliferace a výzkumných disciplínách.

Buňky NIH-3T3 jsou ve výzkumu klíčové pro svůj rychlý růst, vřetenovitou morfologii a univerzálnost v genetických a onkogenních studiích. Jejich spontánní imortalizace a genetická stabilita zvyšují jejich užitečnost při zkoumání buněčné dynamiky a farmakologických účinků. Rozmanitost této buněčné linie, včetně její reakce na různé substráty a existence specializovaných subklonů, jako jsou 3T3-L1 a 3T3-J2, podtrhuje její širokou použitelnost a zásadní roli při prohlubování našeho chápání buněčného chování a mechanismů onemocnění.

Tkáň
Embryonální
Aplikace
Transfekční hostitel
Synonyma
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Vřetenovitá morfologie svědčící o jejich fibroblastické povaze
Typ buňky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
NIH-3T3 (katalogové číslo Cytion 400101)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Exprese a náchylnost

Viry
Test MAP: Negativní.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
NIH Swiss
Věk dárce
Embrya