Pereiti prie turinio
NIH-3T3
Audinys
Embrioninis
Sinonimai
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumentai

NIH-3T3

Cell line · Prekės numeris 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NIH-3T3 ląstelės yra fibroblastų ląstelių linija, gauta iš NIH Swiss pelės embriono audinio. Šios ląstelės pasižymi verpstės formos morfologija ir yra plačiai naudojamos moksliniuose tyrimuose dėl gebėjimo greitai augti ir pasiekti didelį ląstelių tankį. NIH-3T3 ląstelės ypač pasižymi savo naudingumu genetiniuose tyrimuose, įskaitant DNR transfekcijos eksperimentus, kai jos naudojamos svetimos DNR įvedimui į genomą. Dėl to jos tapo vertinga priemone genų funkcijai ir reguliavimui tirti.

Be to, NIH-3T3 ląstelės naudojamos onkogeniniams tyrimams, ypač vėžį sukeliančių genų identifikavimo ir apibūdinimo tyrimams. Jos pasižymi ypatingu gebėjimu palaikyti įvairių tipų virusų, įskaitant sarkomos ir leukemijos virusus, dauginimąsi, todėl yra neatsiejamos nuo virusologijos tyrimų.

Viena iš svarbiausių NIH-3T3 ląstelių linijos savybių yra jos savaiminė imortalizacija. Dėl šios savybės ir jų genetinio stabilumo, kai ląstelės yra nuolat keičiamos, NIH-3T3 ląstelės yra pavyzdinė modelinė sistema, skirta tirti ląstelių procesus, signalinius kelius ir įvairių farmakologinių preparatų poveikį žinduolių ląstelėms.

NIH 3T3 pelių ląstelės pasižymi heterogeniška ląstelių populiacija, todėl jose išryškėja fibroblastų potipiams būdingas ląstelių heterogeniškumas, kuris yra labai svarbus norint išsiaiškinti sudėtingą ląstelių sudėties ir audinių struktūros sąveiką. Šios ląstelės pasižymi verpstės formos morfologija ant chitozano paviršiaus, o ant OCMCS (oksiduotos celiuliozės) paviršiaus pereina į pailgą formą.

NIH3T3 ląstelių linijos ontologija apima įvairius subklonus, įskaitant 3T3-L1, adipogenezės modelį, ir 3T3-J2, naudojamą kaip maitinamąjį sluoksnį keratinocitų kultūrose, o tai rodo, kad ši ląstelių linija gali būti plačiai taikoma įvairiose dauginimosi greičio ir mokslinių tyrimų srityse.

NIH-3T3 ląstelės yra labai svarbios moksliniuose tyrimuose dėl jų greito augimo, verpstės formos morfologijos ir universalumo atliekant genetinius ir onkogeninius tyrimus. Spontaniškas ląstelių nemirtingumas ir genetinis stabilumas padidina jų naudingumą tiriant ląstelių dinamiką ir farmakologinį poveikį. Šios ląstelių linijos įvairovė, įskaitant reakciją į įvairius substratus ir specializuotų sublonų, tokių kaip 3T3-L1 ir 3T3-J2, egzistavimą, pabrėžia jos platų pritaikomumą ir lemiamą vaidmenį gerinant ląstelių elgsenos ir ligų mechanizmų supratimą.

Audinys
Embrioninis
Paraiškos
Transfekcijos šeimininkas
Sinonimai
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Verpstės formos morfologija, rodanti jų fibroblastinę prigimtį
Ląstelių tipas
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
NIH-3T3 (Cytion katalogo numeris 400101)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
MAP testas: Neigiamas.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
NIH Šveicarija
Donoro amžius
Embrionas