Przejdź do treści
NIH-3T3
Chusteczka
Embrionalny
Synonimy
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenty

NIH-3T3

Cell line · Numer produktu 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki NIH-3T3 to linia komórek fibroblastów uzyskana z tkanki zarodka myszy NIH Swiss. Komórki te znane są ze swojej wrzecionowatej morfologii i są szeroko wykorzystywane w badaniach naukowych ze względu na ich zdolność do szybkiego wzrostu i wysokiej gęstości komórek. Komórki NIH-3T3 są szczególnie znane ze swojej użyteczności w badaniach genetycznych, w tym eksperymentach transfekcji DNA, w których są wykorzystywane do wprowadzania obcego DNA do ich genomów. Dzięki temu stały się cennym narzędziem do badania funkcji i regulacji genów.

Dodatkowo, komórki NIH-3T3 są wykorzystywane w badaniach onkogenetycznych, w szczególności w testach identyfikacji i charakterystyki genów powodujących raka. Komórki NIH-3T3 mają niezwykłą zdolność do wspierania rozprzestrzeniania się różnych typów wirusów, w tym wirusów mięsaka i białaczki, co czyni je integralną częścią badań wirusologicznych.

Jedną z kluczowych cech linii komórkowej NIH-3T3 jest jej spontaniczna immortalizacja. Ta cecha, w połączeniu z ich stabilnością genetyczną podczas ciągłego pasażowania, sprawia, że komórki NIH-3T3 są wzorcowym systemem modelowym do badania procesów komórkowych, szlaków sygnałowych i skutków różnych terapii farmakologicznych w komórkach ssaków.

Charakteryzujące się heterogeniczną populacją komórek, mysie komórki NIH 3T3 podkreślają wewnętrzną heterogeniczność komórkową w obrębie podtypów fibroblastów, co ma kluczowe znaczenie dla rozszyfrowania złożonej interakcji między składem komórkowym a architekturą tkanki. Komórki te wykazują wrzecionowatą morfologię na powierzchni chitozanu, przechodząc w wydłużoną formę na powierzchni OCMCS (utleniona celuloza).

Ontologia linii komórkowej NIH3T3 obejmuje różne podklony, w tym 3T3-L1, model adipogenezy i 3T3-J2, stosowany jako warstwa zasilająca w hodowlach keratynocytów, ilustrując szerokie zastosowanie tej linii komórkowej w różnych szybkościach proliferacji i dyscyplinach badawczych.

Komórki NIH-3T3 odgrywają kluczową rolę w badaniach ze względu na ich szybki wzrost, wrzecionowatą morfologię i wszechstronność w badaniach genetycznych i onkogennych. Ich spontaniczna immortalizacja i stabilność genetyczna zwiększają ich użyteczność w badaniu dynamiki komórkowej i efektów farmakologicznych. Różnorodność tej linii komórkowej, w tym jej reakcja na różne substraty i istnienie wyspecjalizowanych subklonów, takich jak 3T3-L1 i 3T3-J2, podkreśla jej szerokie zastosowanie i kluczową rolę w lepszym zrozumieniu zachowania komórek i mechanizmów chorobowych.

Chusteczka
Embrionalny
Zastosowania
Host transfekcji
Synonimy
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Wrzecionowata morfologia, wskazująca na naturę fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
NIH-3T3 (numer katalogowy Cytion 400101)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Test MAP: Negatywny.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
NIH Swiss
Wiek dawcy
Zarodek