Pāriet uz saturu
NIH-3T3
Audums
Embrionālais
Sinonīmi
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenti

NIH-3T3

Cell line · Preces numurs 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NIH-3T3 šūnas ir fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no NIH Šveices peles embrija audiem. Šīs šūnas ir pazīstamas ar savu vārpstas formas morfoloģiju, un tās plaši izmanto zinātniskajos pētījumos, jo spēj strauji augt un sasniegt lielu šūnu blīvumu. NIH-3T3 šūnas ir īpaši pazīstamas ar to lietderību ģenētiskajos pētījumos, tostarp DNS transfekcijas eksperimentos, kur tās izmanto svešas DNS ievadīšanai to genomos. Tādējādi tās ir kļuvušas par vērtīgu līdzekli gēnu funkciju un regulācijas izpētei.

Turklāt NIH-3T3 šūnas tiek izmantotas onkogēnu pētījumos, jo īpaši vēzi izraisošo gēnu identificēšanas un raksturošanas testos. Tām piemīt ievērojama spēja atbalstīt dažādu veidu vīrusu, tostarp sarkomas un leikēmijas vīrusu, pavairošanu, padarot tās par neatņemamu virusoloģijas pētījumu sastāvdaļu.

Viena no NIH-3T3 šūnu līnijas galvenajām īpašībām ir tās spontānā imortalizācija. Šī īpašība apvienojumā ar to ģenētisko stabilitāti nepārtrauktas pasāžas laikā padara NIH-3T3 šūnas par paraugsistēmu šūnu procesu, signalizācijas ceļu un dažādu farmakoloģisko preparātu ietekmes izpētei zīdītāju šūnās.

NIH 3T3 peļu šūnas, kurām raksturīga heterogēna šūnu populācija, uzsver raksturīgo šūnu heterogenitāti fibroblastu apakštipos, kas ir ļoti svarīga, lai atšifrētu sarežģīto mijiedarbību starp šūnu sastāvu un audu arhitektūru. Šīm šūnām uz hitozāna virsmas ir vārpstiņveida morfoloģija, kas uz OCMCS (oksidētas celulozes) virsmas pāriet uz iegarenu formu.

NIH3T3 šūnu līnijas ontoloģija ietver dažādus subklonus, tostarp 3T3-L1, kas ir adipogēzes modelis, un 3T3-J2, ko izmanto kā barojošo slāni keratinocītu kultūrās, tādējādi ilustrējot šūnu līnijas plašo pielietojamību dažādos proliferācijas rādītājos un pētniecības jomās.

NIH-3T3 šūnas ir ļoti svarīgas pētniecībā, jo tām ir ātra augšana, vārpstas formas morfoloģija un daudzpusība ģenētiskos un onkogēnos pētījumos. To spontānā imortalizācija un ģenētiskā stabilitāte palielina to lietderību šūnu dinamikas un farmakoloģiskās iedarbības izpētē. Šīs šūnu līnijas daudzveidība, tostarp tās reakcija uz dažādiem substrātiem un specializētu subklonu, piemēram, 3T3-L1 un 3T3-J2, pastāvēšana, uzsver tās plašo pielietojamību un izšķirošo nozīmi, lai uzlabotu mūsu izpratni par šūnu uzvedību un slimību mehānismiem.

Audums
Embrionālais
Pieteikumi
Transfekcijas saimnieks
Sinonīmi
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Vārpstiņveida morfoloģija, kas norāda uz to fibroblastu raksturu
Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
NIH-3T3 (Cytion kataloga numurs 400101)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
MAP tests: Negatīvs.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
NIH Šveice
Donora vecums
Embrijs