Gå til innholdet
NIH-3T3
Vev
Embryonale
Synonymer
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenter

NIH-3T3

Cell line · Produktnummer 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NIH-3T3-celler er en fibroblastcellelinje som stammer fra vev fra et NIH Swiss museembryo. Disse cellene er kjent for sin spindelformede morfologi og er mye brukt i vitenskapelig forskning på grunn av sin evne til å vokse raskt og til en høy celletetthet. NIH-3T3-celler er spesielt kjent for sin anvendelighet i genetiske studier, inkludert DNA-transfeksjonseksperimenter, der de brukes til å introdusere fremmed DNA i genomet. Dette har gjort dem til et verdifullt verktøy for å studere geners funksjon og regulering.

NIH-3T3-celler brukes også i onkogen forskning, spesielt i analyser for identifisering og karakterisering av kreftfremkallende gener. De har en bemerkelsesverdig evne til å støtte formering av ulike typer virus, inkludert sarkom- og leukemivirus, noe som gjør dem til en integrert del av virologiske studier.

Et av de viktigste kjennetegnene ved NIH-3T3-cellelinjen er dens spontane udødeliggjøring. Denne egenskapen, kombinert med den genetiske stabiliteten over kontinuerlig passering, gjør NIH-3T3-celler til et eksemplarisk modellsystem for utforskning av cellulære prosesser, signalveier og effekten av ulike farmakologiske behandlinger i pattedyrceller.

NIH 3T3-celler fra mus kjennetegnes av en heterogen cellepopulasjon, noe som understreker den iboende cellulære heterogeniteten innenfor fibroblastundertyper, som er avgjørende for å kunne dechiffrere det komplekse samspillet mellom cellesammensetning og vevsarkitektur. Disse cellene har en spindelaktig morfologi på en kitosanoverflate, som går over til en langstrakt form på OCMCS-overflater (oksidert cellulose).

Ontologien til NIH3T3-cellelinjen omfatter ulike subkloner, inkludert 3T3-L1, en modell for adipogenese, og 3T3-J2, som brukes som materlag i keratinocyttkulturer, noe som illustrerer cellelinjens brede anvendelighet på tvers av ulike proliferasjonshastigheter og forskningsdisipliner.

NIH-3T3-celler er sentrale i forskningen på grunn av sin raske vekst, spindelformede morfologi og allsidighet i genetiske og onkogene studier. Den spontane udødeliggjøringen og den genetiske stabiliteten gjør dem enda mer anvendelige i studier av celledynamikk og farmakologiske effekter. Mangfoldet i denne cellelinjen, inkludert dens respons på ulike substrater og eksistensen av spesialiserte subkloner som 3T3-L1 og 3T3-J2, understreker dens brede anvendelighet og kritiske rolle når det gjelder å fremme vår forståelse av cellulær atferd og sykdomsmekanismer.

Vev
Embryonale
Søknader
Vert for transfeksjon
Synonymer
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Spindel-lignende morfologi, noe som tyder på at de er fibroblaster
Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NIH-3T3 (Cytion katalognummer 400101)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
MAP-test: Negativ.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
NIH Sveits
Donorens alder
Embryo