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NIH-3T3
ティッシュ
胎生期
同義語
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

NIH-3T3

Cell line · 製品番号 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

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01概要

説明

NIH-3T3細胞は、NIHスイスマウス胚の組織から得られた線維芽細胞株である。この細胞は紡錘形の形態で知られ、急速に増殖し、細胞密度が高いため、科学研究に広く利用されている。NIH-3T3細胞は、DNAトランスフェクション実験など、ゲノムに外来DNAを導入するための遺伝学的研究における有用性で特に注目されている。このため、遺伝子の機能と制御を研究するための貴重なツールとなっている。

さらに、NIH-3T3細胞は、がん原性研究、特にがんを引き起こす遺伝子の同定と特徴付けのためのアッセイに用いられている。NIH-3T3細胞は、肉腫ウイルスや白血病ウイルスを含む様々な種類のウイルスの増殖をサポートする顕著な能力を持っており、ウイルス学研究に不可欠である。

NIH-3T3細胞株の重要な特徴の一つは、自然発生的な不死化である。この特徴は、連続継代による遺伝的安定性と相まって、NIH-3T3細胞を、哺乳動物細胞における細胞プロセス、シグナル伝達経路、様々な薬理学的治療の効果を研究するための模範的なモデル系にしている。

異種細胞集団によって特徴づけられるNIH 3T3マウス細胞は、線維芽細胞のサブタイプに内在する細胞の不均一性を強調するものであり、細胞組成と組織構築の間の複雑な相互作用を解読するために重要である。これらの細胞は、キトサン表面では紡錘形の形態を示し、OCMCS(酸化セルロース)表面では細長い形態に変化する。

NIH3T3細胞株オントロジーは、脂肪形成のモデルである3T3-L1や、ケラチノサイト培養のフィーダー層として使用される3T3-J2など、様々なサブクローンを包含しており、この細胞株が様々な増殖速度や研究分野に幅広く応用できることを示している。

NIH-3T3細胞は、その急速な増殖、紡錘形の形態、遺伝学的および発癌学的研究における多用途性から、研究において極めて重要である。その自発的不死化と遺伝的安定性は、細胞動態や薬理学的効果を研究する上での有用性を高めている。様々な基質に対する応答や、3T3-L1や3T3-J2のような特殊なサブクローンの存在など、この細胞株には多様性があり、細胞挙動や疾患メカニズムの理解を進める上で、その広範な応用可能性と重要な役割が強調されている。

ティッシュ
胎生期
用途
トランスフェクション宿主
同義語
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
繊維芽細胞であることを示す紡錘状の形態
細胞の種類
線維芽細胞

04識別子

引用
NIH-3T3 (Cytion カタログ番号 400101)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0594

05発現と感受性

ウイルス
MAPテスト:陰性。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
NIHスイス
ドナーの年齢
胚