Gå direkte til indholdet
NIH-3T3
Væv
Embryonal
Synonymer
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenter

NIH-3T3

Cell line · Varenummer 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NIH-3T3-celler er en fibroblastcellelinje, der stammer fra væv fra et NIH Swiss-museembryo. Disse celler er kendt for deres spindelformede morfologi og anvendes i vid udstrækning i videnskabelig forskning på grund af deres evne til at vokse hurtigt og til en høj celletæthed. NIH-3T3-celler er især kendt for deres anvendelighed i genetiske studier, herunder DNA-transfektionseksperimenter, hvor de bruges til at indføre fremmed DNA i deres genomer. Det har gjort dem til et værdifuldt værktøj til at studere geners funktion og regulering.

Derudover anvendes NIH-3T3-celler i onkogen forskning, især i analyser til identifikation og karakterisering af kræftfremkaldende gener. De har en bemærkelsesværdig evne til at understøtte udbredelsen af forskellige typer vira, herunder sarkom- og leukæmivira, hvilket gør dem til en integreret del af virologistudier.

Et af de vigtigste træk ved NIH-3T3-cellelinjen er dens spontane udødelighed. Denne egenskab kombineret med deres genetiske stabilitet over kontinuerlig passage gør NIH-3T3-celler til et eksemplarisk modelsystem til udforskning af cellulære processer, signalveje og virkningerne af forskellige farmakologiske behandlinger i pattedyrsceller.

NIH 3T3-musceller er kendetegnet ved en heterogen cellepopulation og understreger den iboende cellulære heterogenitet inden for fibroblastundertyper, hvilket er afgørende for at afkode det komplekse samspil mellem cellulær sammensætning og vævsarkitektur. Disse celler udviser en spindellignende morfologi på en chitosanoverflade og overgår til en langstrakt form på OCMCS-overflader (oxideret cellulose).

NIH3T3-cellelinjens ontologi omfatter forskellige subkloner, herunder 3T3-L1, en model for adipogenese, og 3T3-J2, der anvendes som feederlag i keratinocytkulturer, hvilket illustrerer cellelinjens brede anvendelighed på tværs af forskellige spredningshastigheder og forskningsdiscipliner.

NIH-3T3-celler er centrale i forskningen på grund af deres hurtige vækst, spindelformede morfologi og alsidighed i genetiske og onkogene undersøgelser. Deres spontane udødelighed og genetiske stabilitet øger deres anvendelighed i udforskningen af cellulær dynamik og farmakologiske effekter. Diversiteten inden for denne cellelinje, herunder dens reaktion på forskellige substrater og eksistensen af specialiserede subkloner som 3T3-L1 og 3T3-J2, understreger dens brede anvendelighed og kritiske rolle i at fremme vores forståelse af cellulær adfærd og sygdomsmekanismer.

Væv
Embryonal
Anvendelser
Vært for transfektion
Synonymer
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Spindel-lignende morfologi, der indikerer deres fibroblast-natur
Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NIH-3T3 (Cytion katalognummer 400101)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Udtryk og modtagelighed

Vira
MAP-testme: Negativ.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
NIH Schweiz
Donorens alder
Embryo