Prejsť na obsah
NIH-3T3
Tkanivo
Embryonálne
Synonymá
NIH/3T3, NIH 3T3, NIH3T3, 3T3, 3T3NIH, 3T3-Swiss, Swiss-3T3, Swiss/3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenty

NIH-3T3

Cell line · Číslo výrobku 400101

NIH-3T3 cells are a fibroblast cell line derived from the tissue of a NIH Swiss mouse embryo. These cells are known for their spindle-shaped morphology an...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky NIH-3T3 sú fibroblastovou bunkovou líniou odvodenou z tkaniva embrya myši NIH Swiss. Tieto bunky sú známe svojou vretenovitou morfológiou a sú široko využívané vo vedeckom výskume vďaka svojej schopnosti rýchleho rastu a vysokej hustote buniek. Bunky NIH-3T3 sú obzvlášť známe svojou využiteľnosťou v genetických štúdiách vrátane experimentov s transfekciou DNA, kde sa používajú na zavedenie cudzej DNA do genómu. Vďaka tomu sa stali cenným nástrojom na štúdium funkcie a regulácie génov.

Okrem toho sa bunky NIH-3T3 využívajú v onkogénnom výskume, konkrétne v testoch na identifikáciu a charakterizáciu génov spôsobujúcich rakovinu. Majú pozoruhodnú schopnosť podporovať rozmnožovanie rôznych typov vírusov vrátane sarkómových a leukemických vírusov, vďaka čomu sú neoddeliteľnou súčasťou virologických štúdií.

Jednou z kľúčových vlastností bunkovej línie NIH-3T3 je jej spontánna imortalizácia. Táto vlastnosť v kombinácii s ich genetickou stabilitou počas nepretržitého pasážovania robí z buniek NIH-3T3 príkladný modelový systém na skúmanie bunkových procesov, signálnych dráh a účinkov rôznych farmakologických liečebných postupov v bunkách cicavcov.

Myšie bunky NIH 3T3, ktoré sa vyznačujú heterogénnou bunkovou populáciou, zdôrazňujú vnútornú bunkovú heterogenitu v rámci subtypov fibroblastov, ktorá je rozhodujúca pre dešifrovanie komplexnej interakcie medzi bunkovým zložením a architektúrou tkaniva. Tieto bunky vykazujú vretenovitú morfológiu na chitosanovom povrchu, ktorá na povrchu OCMCS (oxidovaná celulóza) prechádza do predĺženej formy.

Ontológia bunkovej línie NIH3T3 zahŕňa rôzne subklony vrátane 3T3-L1, modelu pre adipogenézu, a 3T3-J2, ktorý sa používa ako napájacia vrstva v keratinocytových kultúrach, čo ilustruje širokú použiteľnosť bunkovej línie v rôznych mierach proliferácie a výskumných disciplínach.

Bunky NIH-3T3 sú kľúčové vo výskume pre svoj rýchly rast, vretenovitú morfológiu a univerzálnosť v genetických a onkogénnych štúdiách. Ich spontánna imortalizácia a genetická stabilita zvyšujú ich využiteľnosť pri skúmaní bunkovej dynamiky a farmakologických účinkov. Rozmanitosť tejto bunkovej línie, vrátane jej reakcie na rôzne substráty a existencie špecializovaných subklonov, ako sú 3T3-L1 a 3T3-J2, zdôrazňuje jej širokú použiteľnosť a rozhodujúcu úlohu pri zlepšovaní nášho chápania bunkového správania a mechanizmov chorôb.

Tkanivo
Embryonálne
Aplikácie
Transfekčný hostiteľ
Synonymá
  • NIH/3T3
  • NIH 3T3
  • NIH3T3
  • 3T3
  • 3T3NIH
  • 3T3-Swiss
  • Swiss-3T3
  • Swiss/3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Morfológia podobná vretenu, čo svedčí o ich fibroblastovej povahe
Typ bunky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
NIH-3T3 (katalógové číslo Cytion 400101)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0594

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Test MAP: Negatívny.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
NIH Swiss
Vek darcu
Embryo