C2C12

A linhagem celular C2C12, uma linhagem de mioblastos imortalizados de camundongo, derivada do músculo da coxa de um camundongo de 2 meses de idade da linhagem C3H, é amplamente utilizada na pesquisa biomédica devido às suas propriedades únicas de diferenciação celular. As células mioblásticas C2C12 proliferam rapidamente e exibem características típicas de mioblastos em condições de alto teor de soro. Ao serem transferidas para condições de baixo teor de soro ou em estado de privação, as células C2C12 iniciam a diferenciação miogênica, transformando-se em miotubos, que são precursores das células contráteis do músculo esquelético.

As células C2C12 incorporam facilmente cDNA e ácidos nucleicos exógenos por meio de transfecção, tornando-as uma boa opção para estudos de expressão gênica e investigações sobre a diferenciação de mioblastos e miotubos. O processo de diferenciação é marcado pela expressão de marcadores miogênicos, como Myf5, MyoD, Myogenin e Mrf4, juntamente com marcadores específicos do músculo, como Csrp3 e Mef2a, que são essenciais no estudo de diferentes fenótipos musculares e na regeneração do músculo esquelético.

A forma única dos mioblastos C2C12 e sua transformação em anéis de células mioblásticas e, posteriormente, em miotubos maduros em meios suplementados com soro ressaltam a natureza dinâmica dessas células e seu potencial na pesquisa do músculo esquelético.

Pesquisadores utilizam substratos como hidrogéis de gelatina para culturas de células C2C12 a fim de simular condições musculares in vivo, possibilitando estudos detalhados do desenvolvimento das células musculares e dos efeitos da matriz extracelular. O perfil metabólico revela insights fundamentais sobre as vias envolvidas na formação e recuperação muscular, com foco nas proteínas essenciais e no papel do cálcio na contração. Técnicas de silenciamento gênico esclarecem ainda mais o processo de diferenciação, destacando a importância da fosforilação de SMAD1 na regeneração muscular, crucial para a compreensão da recuperação em casos de atrofia e lesões musculares.

Em resumo, a linhagem celular C2C12 serve como uma ferramenta essencial no campo da pesquisa biomédica, oferecendo uma plataforma versátil para explorar as complexidades da formação e diferenciação muscular, expressão gênica e o profundo impacto de vários fatores na linhagem celular do músculo esquelético, incluindo o papel fundamental dos miofilamentos, das proteínas dos filamentos intermediários e do contexto geral do organismo no qual esses processos celulares se desenrolam.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.